-
Aromaterapia Puhdas luonnollinen eukalyptuslehden eteerinen öljy ihon ja vartalon hoitoon
Uutto- tai käsittelymenetelmä: höyrytislattu
Tislausuutto-osa: lehti
Alkuperämaa: Kiina
Käyttö: Diffuusori/aromaterapia/hieronta
Säilyvyysaika: 3 vuotta
Räätälöity palvelu: mukautettu tarra ja laatikko tai vaatimuksesi mukaan
Sertifiointi: GMPC/FDA/ISO9001/MSDS/COA
Eukalyptusöljy reagoi liman kanssa ja irrottaa sitä, mikä tarjoaa välitöntä helpotusta hengenahdistukseen ja muihin hengitystieongelmiin. Se on riittävän tehokas toimimaan hyönteiskarkotteena. Aromaterapiassa käytettynä se selkeyttää ajatuksia. Sen terapeuttiset hyödyt johtuvat sen antimikrobisista, antibakteerisista, antiseptisistä, kouristuksia estävistä ja antiviraalisista ominaisuuksista. Käytä eukalyptusöljyä erilaisiin iho- ja terveysongelmiin. Se sisältää eukalyptolia, joka tunnetaan myös nimellä kineoli. Tämä yhdiste tukee yleistä terveyttäsi ja hyvinvointiasi.
-
Luonnollinen, puhdas orgaaninen laventelin eteerinen öljy aromaterapiaihonhoitoon
Uutto- tai käsittelymenetelmä: Höyrytislattu
Tislausuutto-osa: Kukka
Alkuperämaa: Kiina
Käyttö: Diffuusori/aromaterapia/hieronta
Säilyvyysaika: 3 vuotta
Räätälöity palvelu: mukautettu tarra ja laatikko tai vaatimuksesi mukaan
Sertifiointi: GMPC/FDA/ISO9001/MSDS/COA
-
100 % puhdasta luonnollista orgaanista Magnoliae Officmalis Cortex -öljyä ihonhoitoon
Hou Pon tuoksu on välittömästi kitkerä ja terävän pistävä, ja se avautuu sitten vähitellen syvällä, siirappisella makeudella ja lämmöllä.
Hou Polla on suhde maa- ja metallielementteihin, joissa sen karvas lämpö vaikuttaa voimakkaasti Qi:n ja kuivan kosteuden laskeutumiseen. Näiden ominaisuuksien vuoksi sitä käytetään kiinalaisessa lääketieteessä lievittämään ruoansulatuskanavan tukkeutumista ja stagnaatiota sekä yskää ja hengityksen vinkumista, jotka johtuvat liman tukkeutumisesta keuhkoihin.
Magnolia Officinials on lehtipuu, joka on kotoisin Sichuanin, Hubein ja muiden Kiinan maakuntien vuorilta ja laaksoista. Perinteisessä kiinalaisessa lääketieteessä käytetty erittäin aromaattinen kuori irrotetaan varsista, oksista ja juurista. Se kerätään huhtikuusta kesäkuuhun. Paksu, sileä ja öljyinen kuori on sisäpuolelta violetin värinen ja kiteinen.
Harjoittajat voivat harkita Hou Pon ja Qing Pi -eteerisen öljyn yhdistämistä täydentämään päätuoksua sekoituksissa, joiden tarkoituksena on hajottaa kasautumista.
-
OEM-mukautettu pakkaus Luonnollinen Macrocephalae Rhizoma -öljy
Tehokkaana kemoterapia-aineena 5-fluorourasiilia (5-FU) käytetään laajalti pahanlaatuisten kasvainten hoitoon ruoansulatuskanavassa, pään, kaulan, rintakehän ja munasarjojen alueella. 5-FU on myös kliinisesti ensilinjan lääke paksusuolen syövän hoitoon. 5-FU:n vaikutusmekanismi on estää urasiilinukleiinihapon muuttuminen tymiininukleiinihapoksi kasvainsoluissa ja sitten vaikuttaa DNA:n ja RNA:n synteesiin ja korjaukseen sytotoksisen vaikutuksen saavuttamiseksi (Afzal et al., 2009; Ducreux et al., 2015; Longley et al., 2003). 5-FU aiheuttaa kuitenkin myös kemoterapian aiheuttamaa ripulia (CID), joka on yksi yleisimmistä haittavaikutuksista, joka vaivaa monia potilaita (Filho et al., 2016). Ripulin esiintyvyys 5-FU:lla hoidetuilla potilailla oli jopa 50–80 %, mikä vaikutti vakavasti kemoterapian etenemiseen ja tehoon (Iacovelli et al., 2014; Rosenoff et al., 2006). Siksi on erittäin tärkeää löytää tehokas hoito 5-FU:n aiheuttamaan CID:hen.
Tällä hetkellä lääkkeettömiä ja lääkkeellisiä interventioita on tuotu CID:n kliiniseen hoitoon. Lääkkeettömiin interventioihin kuuluvat kohtuullinen ruokavalio sekä suolan, sokerin ja muiden ravintoaineiden lisääminen ruokavalioon. Lääkkeitä, kuten loperamidia ja oktreotidia, käytetään yleisesti CID:n ripulihoidossa (Benson et al., 2004). Lisäksi etnolääkkeitä on otettu käyttöön CID:n hoidossa niiden omilla ainutlaatuisilla hoitomuodoilla eri maissa. Perinteinen kiinalainen lääketiede (TCM) on tyypillinen etnolääketiede, jota on harjoitettu yli 2000 vuotta Itä-Aasian maissa, kuten Kiinassa, Japanissa ja Koreassa (Qi et al., 2010). TCM:n mukaan kemoterapeuttiset lääkkeet aiheuttavat Qi:n kulutusta, pernan puutetta, mahan epäharmoniaa ja endofyyttistä kosteutta, mikä johtaa suoliston konduktiiviseen toimintahäiriöön. TCM-teorian mukaan CID:n hoitostrategian tulisi perustua pääasiassa Qi:n täydentämiseen ja pernan vahvistamiseen (Wang et al., 1994).
Kuivatut juuretAtractylodes macrocephalaKoidz. (AM) jaPanax-ginsengCA Mey. (PG) ovat tyypillisiä kiinalaisen lääketieteen rohdosvalmisteita, joilla on samat vaikutukset Qi:n täydentämisessä ja pernan vahvistamisessa (Li et al., 2014). AM:ää ja PG:tä käytetään yleensä yrttipareina (yksinkertaisin muoto kiinalaisesta yrttiyhteensopivuudesta) Qi:n täydentämisessä ja pernan vahvistamisessa ripulin hoidossa. Esimerkiksi AM:ää ja PG:tä on dokumentoitu klassisissa ripulilääkkeissä, kuten Shen Ling Bai Zhu San, Si Jun Zi Tang ja ...Taiping Huimin Heji Ju Fang(Song-dynastia, Kiina) ja Bu Zhong Yi Qi Tang alkaenPi Wei Lun(Yuan-dynastia, Kiina) (kuva 1). Useissa aiemmissa tutkimuksissa on raportoitu, että kaikilla kolmella koostumuksella on kyky lievittää CID:tä (Bai et al., 2017; Chen et al., 2019; Gou et al., 2016). Lisäksi aiempi tutkimuksemme osoitti, että Shenzhu-kapseleilla, jotka sisältävät vain AM:tä ja PG:tä, on potentiaalisia vaikutuksia ripulin, paksusuolitulehduksen (xiexie-oireyhtymä) ja muiden ruoansulatuskanavan sairauksien hoidossa (Feng et al., 2018). Yhdessäkään tutkimuksessa ei kuitenkaan ole käsitelty AM:n ja PG:n vaikutusta ja mekanismia CID:n hoidossa, joko yhdessä tai yksinään.
Nykyään suoliston mikrobistoa pidetään potentiaalisena tekijänä perinteisen lääketieteen (TCM) terapeuttisen mekanismin ymmärtämisessä (Feng et al., 2019). Nykyaikaiset tutkimukset osoittavat, että suoliston mikrobistolla on ratkaiseva rooli suoliston homeostaasin ylläpitämisessä. Terve suoliston mikrobisto edistää suoliston limakalvon suojautumista, aineenvaihduntaa, immuunijärjestelmän homeostaasia ja -vastetta sekä taudinaiheuttajien tukahduttamista (Thursby ja Juge, 2017; Pickard et al., 2017). Häiriintynyt suoliston mikrobisto heikentää ihmiskehon fysiologisia ja immuunitoimintoja suoraan tai epäsuorasti aiheuttaen sivureaktioita, kuten ripulia (Patel et al., 2016; Zhao ja Shen, 2010). Tutkimukset ovat osoittaneet, että 5-FU muutti merkittävästi suoliston mikrobiston rakennetta ripulilla sairastavilla hiirillä (Li et al., 2017). Siksi AM:n ja PM:n vaikutukset 5-FU:n aiheuttamaan ripuliin voivat johtua suoliston mikrobistosta. On kuitenkin vielä tuntematonta, voisivatko AM ja PG yksinään ja yhdessä estää 5-FU:n aiheuttamaa ripulia moduloimalla suoliston mikrobistoa.
Tutkiaksemme AM:n ja PG:n ripulia estäviä vaikutuksia ja taustalla olevaa mekanismia, käytimme 5-FU:ta ripulimallin simulointiin hiirillä. Tässä tutkimuksessa keskityimme kerta- ja yhdistelmäannostelun (AP) mahdollisiin vaikutuksiin.Atractylodes macrocephalaeteerinen öljy (AMO) jaPanax-ginsengKokonaisten saponiinien (PGS), AM:stä ja PG:stä uutettujen aktiivisten komponenttien, vaikutus ripuliin, suoliston patologiaan ja mikrobirakenteeseen 5-FU-kemoterapian jälkeen.
-
100 % puhdasta luonnollista Eucommiae Foliuml -öljyä ihonhoitoon
Eucommia ulmoides(EU) (kiinaksi yleisesti ”Du Zhong”) kuuluvat Eucommiaceae-heimoon, joka on Keski-Kiinasta kotoisin oleva pieni puusuku.1Tätä kasvia viljellään laajalti Kiinassa sen lääkinnällisen merkityksen vuoksi. EU:sta on eristetty noin 112 yhdistettä, joihin kuuluvat lignaanit, iridoidit, fenolit, steroidit ja muut yhdisteet. Tämän kasvin täydentävät yrttivalmisteet (kuten herkullinen tee) ovat osoittaneet joitakin lääkinnällisiä ominaisuuksia. EU:n lehdellä on suurempi aktiivisuus kuoren, kukan ja hedelmän suhteen [2,3EU:n lehtien on raportoitu parantavan luuston voimaa ja lihaksia [4], mikä johtaa pitkäikäisyyteen ja edistää hedelmällisyyttä ihmisillä [5EU:n lehdistä valmistetun herkullisen teeseoksen on raportoitu vähentävän rasvaisuutta ja tehostavan energia-aineenvaihduntaa. Flavonoidiyhdisteiden (kuten rutiinin, klorogeenihapon, ferulihapon ja kofeiinihapon) on raportoitu osoittavan antioksidanttista aktiivisuutta EU:n lehdissä [6].
Vaikka EU:n fytokemiallisista ominaisuuksista on olemassa riittävästi kirjallisuutta, EU:n kuorista, siemenistä, varsista ja lehdistä uutettujen eri yhdisteiden farmakologisista ominaisuuksista on kuitenkin tehty vain vähän tutkimuksia. Tässä katsausartikkelissa selvennetään yksityiskohtaista tietoa EU:n eri osista (kuori, siemenet, varsi ja lehti) uutetuista eri yhdisteistä ja näiden yhdisteiden mahdollisista käyttötavoista terveyttä edistävinä ominaisuuksina tieteellisen näytön avulla ja tarjotaan siten vertailumateriaalia EU:n soveltamiseen.
-
Puhdas luonnollinen Houttuynia cordata -öljy Houttuynia cordata -öljy Lchthammolum-öljy
Useimmissa kehitysmaissa 70–95 % väestöstä on riippuvainen perinteisistä lääkkeistä perusterveydenhuollossa, ja näistä 85 % ihmisistä käyttää kasveja tai niiden uutteita vaikuttavana aineena.1Uusien biologisesti aktiivisten yhdisteiden etsintä kasveista riippuu yleensä paikallisilta ammattilaisilta saadusta etnisestä ja kansanperinteisestä tiedosta, ja sitä pidetään edelleen tärkeänä lääkekehityksen lähteenä. Intiassa noin 2000 lääkettä on kasviperäisiä.2Ottaen huomioon laajalle levinneen kiinnostuksen lääkekasvien käyttöön, tässä katsauksessaHouttuynia cordataThunb. tarjoaa ajantasaista tietoa kirjallisuudessa esiintyvistä kasvitieteellisistä, kaupallisista, etnofarmakologisista, fytokemiallisista ja farmakologisista tutkimuksista.H. cordataThunb. kuuluu perheeseenSaururaceae-kasvitja se tunnetaan yleisesti kiinalaisen liskohäntänä. Se on monivuotinen yrtti, jolla on rönsyilevä juurakko ja jolla on kaksi erillistä kemotyyppiä.3,4Lajin kiinalainen kemotyyppi esiintyy villissä ja puolivillissä olosuhteissa Intian koillisosassa huhtikuusta syyskuuhun.5,6,7]H. cordataon saatavilla Intiassa, erityisesti Assamin Brahmaputran laaksossa, ja sitä käyttävät useat Assamin heimot vihanneksen muodossa sekä perinteisesti erilaisiin lääkinnällisiin tarkoituksiin.
-
100 % puhdasta Arctium lappa -öljyä Valmistaja – Luonnollinen kalkki Arctium lappa -öljy laadunvarmistussertifikaateilla
Terveyshyödyt
Takiaisen juurta syödään usein, mutta sitä voidaan myös kuivata ja liottaa teessä. Se toimii hyvänä inuliinin lähteenä, joka onprebioottikuitua, joka edistää ruoansulatusta ja parantaa suoliston terveyttä. Lisäksi tämä juuri sisältää flavonoideja (kasvien ravintoaineita),fytokemikaalitja antioksidantteja, joilla tiedetään olevan terveyshyötyjä.
Lisäksi takiaisen juuri voi tarjota muita hyötyjä, kuten:
Vähentää kroonista tulehdusta Takiaisen juuri sisältää useita antioksidantteja, kuten kversetiiniä, fenolihappoja ja luteoliinia, jotka voivat auttaa suojaamaan solujasivapaat radikaalitNämä antioksidantit auttavat vähentämään tulehdusta koko kehossa.
Terveysriskit
Takiaisen juuren katsotaan olevan turvallista syödä tai juoda teenä. Tämä kasvi muistuttaa kuitenkin läheisesti belladonna-koisokasveja, jotka ovat myrkyllisiä. On suositeltavaa ostaa takiaisen juurta vain luotettavilta myyjiltä ja pidättäytyä sen keräämisestä itse. Lisäksi sen vaikutuksista lapsiin tai raskaana oleviin naisiin on vain vähän tietoa. Keskustele lääkärisi kanssa ennen kuin käytät takiaisen juurta lasten kanssa tai jos olet raskaana.
Tässä on joitakin muita mahdollisia terveysriskejä, jotka on otettava huomioon, jos käytät takiaisen juurta:
Lisääntynyt nestehukka
Takiaisenjuuri toimii luonnollisena diureettina, mikä voi johtaa nestehukkaan. Jos käytät nesteenpoistolääkkeitä tai muita nesteenpoistolääkkeitä, sinun ei tule ottaa takiaisenjuurta. Jos käytät näitä lääkkeitä, on tärkeää olla tietoinen muista lääkkeistä, yrteistä ja ainesosista, jotka voivat johtaa nestehukkaan.
Allerginen reaktio
Jos olet herkkä tai sinulla on ollut allergisia reaktioita päivänkakkaroille, pujolle tai krysanteemeille, sinulla on lisääntynyt riski saada allerginen reaktio takiaisen juurelle.
-
Tukkumyyntihinta irtotavarana 100 % puhdasta AsariRadix Et Rhizoma -öljyä Rentoudu aromaterapiassa Eucalyptus globulus
Eläin- ja in vitro -tutkimuksissa on tutkittu sassafran ja sen komponenttien mahdollisia sienilääkkeitä, tulehdusta ehkäiseviä ja sydän- ja verisuonitautien vastaisia vaikutuksia. Kliinisiä tutkimuksia kuitenkin puuttuu, eikä sassafrasta pidetä turvallisena käyttää. Yhdysvaltain elintarvike- ja lääkevirasto (FDA) on kieltänyt safrolin, sassafran juurikuoren ja -öljyn pääainesosan, käytön, mukaan lukien käytön aromi- tai hajusteaineena, eikä sitä tule käyttää sisäisesti tai ulkoisesti, koska se on mahdollisesti syöpää aiheuttava. Safrolia on käytetty 3,4-metyleenidioksimetamfetamiinin (MDMA), joka tunnetaan myös katunimillä "ecstasy" tai "Molly", laittomassa tuotannossa, ja Yhdysvaltain huumevalvontavirasto (DEA) valvoo safrolin ja sassafrasöljyn myyntiä.
-
Tukkumyyntihinta 100 % puhdasta Stellariae Radix -eteeristä öljyä (uusi) Rentoudu aromaterapiassa Eucalyptus globulus
Kiinan farmakopean (vuoden 2020 painos) mukaan YCH:n metanoliuutteen on oltava vähintään 20,0 % [2], ilman muita laatuarviointi-indikaattoreita. Tämän tutkimuksen tulokset osoittavat, että sekä villien että viljeltyjen näytteiden metanoliuutteiden pitoisuudet täyttivät farmakopean standardin, eikä niiden välillä ollut merkittävää eroa. Siksi villien ja viljeltyjen näytteiden välillä ei ollut ilmeistä laatueroa kyseisen indeksin mukaan. Kokonaissterolien ja kokonaisflavonoidien pitoisuudet villinäytteissä olivat kuitenkin merkittävästi korkeammat kuin viljellyissä näytteissä. Lisämetabolomianalyysi paljasti runsaan metaboliittien monimuotoisuuden villien ja viljeltyjen näytteiden välillä. Lisäksi seulottiin pois 97 merkittävästi erilaista metaboliittia, jotka on lueteltuLisätaulukko S2Näiden merkittävästi erilaisten metaboliittien joukossa ovat β-sitosteroli (ID on M397T42) ja kversetiinijohdannaiset (M447T204_2), joiden on raportoitu olevan vaikuttavia aineita. Aiemmin raportoimattomia ainesosia, kuten trigonelliini (M138T291_2), betaiini (M118T277_2), fustiini (M269T36), rotenoni (M241T189), arktiini (M557T165) ja logaanihappo (M399T284_2), sisällytettiin myös erilaisten metaboliittien joukkoon. Näillä komponenteilla on erilaisia rooleja hapettumisen estämisessä, tulehdusta ehkäisevässä toiminnassa, vapaiden radikaalien sieppauksessa, syövän ehkäisyssä ja ateroskleroosin hoidossa, ja siksi ne saattavat muodostaa oletettuja uusia vaikuttavia aineita YCH:ssa. Vaikuttavien aineiden pitoisuus määrää lääkeaineiden tehon ja laadun [7Yhteenvetona voidaan todeta, että metanoliuutteella ainoana YCH:n laadunarviointi-indeksinä on joitakin rajoituksia, ja tarkempia laatumarkkereita on tutkittava lisää. Villin ja viljellyn YCH:n välillä oli merkittäviä eroja kokonaissterolien, kokonaisflavonoidien ja monien muiden erilaisten metaboliittien pitoisuuksissa; joten niiden välillä oli mahdollisesti joitakin laatueroja. Samaan aikaan YCH:n äskettäin löydetyillä potentiaalisilla aktiivisilla aineosilla saattaa olla tärkeä viitearvo YCH:n toiminnallisen perustan tutkimisessa ja YCH-resurssien jatkokehityksessä.
Aitojen lääkemateriaalien merkitys on jo pitkään tunnustettu tietyllä alkuperäalueella erinomaisen laadukkaiden kiinalaisten kasviperäisten lääkkeiden tuotannossa [8]. Korkea laatu on aitojen lääkemateriaalien olennainen ominaisuus, ja elinympäristö on tärkeä tekijä, joka vaikuttaa tällaisten materiaalien laatuun. Siitä lähtien, kun YCH:ta alettiin käyttää lääkkeenä, villi YCH on pitkään ollut hallitseva tekijä. YCH:n onnistuneen käyttöönoton ja kesyttämisen jälkeen Ningxiassa 1980-luvulla Yinchaihu-lääkemateriaalien lähde siirtyi vähitellen villistä viljeltyyn YCH:hon. Aiemman YCH-lähteitä koskevan tutkimuksen mukaan [9] ja tutkimusryhmämme kenttätutkimuksen mukaan viljeltyjen ja villien lääkeaineiden levinneisyysalueilla on merkittäviä eroja. Villi YCH esiintyy pääasiassa Ningxia Huin autonomisella alueella Shaanxin maakunnassa, Sisä-Mongolian kuivan vyöhykkeen ja Keski-Ningxian vieressä. Erityisesti näiden alueiden aavikkoarot ovat sopivin elinympäristö YCH:n kasvulle. Sitä vastoin viljelty YCH on levinnyt pääasiassa villin levinneisyysalueen eteläpuolelle, kuten Tongxinin piirikuntaan (viljelty I) ja sen ympäröiville alueille, josta on tullut Kiinan suurin viljely- ja tuotantokeskus, sekä Pengyangin piirikuntaan (viljelty II), joka sijaitsee eteläisemmällä alueella ja on toinen viljellyn YCH:n tuotantoalue. Lisäksi edellä mainittujen kahden viljellyn alueen elinympäristöt eivät ole aavikkoaroja. Siksi tuotantotavan lisäksi myös villin ja viljellyn YCH:n elinympäristöissä on merkittäviä eroja. Elinympäristö on tärkeä tekijä, joka vaikuttaa kasviperäisten lääkeaineiden laatuun. Eri elinympäristöt vaikuttavat sekundaaristen metaboliittien muodostumiseen ja kertymiseen kasveihin, mikä vaikuttaa lääketuotteiden laatuun [10,11Siksi tässä tutkimuksessa havaitsemamme merkittävät erot flavonoidien ja sterolien kokonaispitoisuuksissa sekä 53 metaboliitin ilmentymisessä saattavat johtua peltojen hoidosta ja elinympäristöjen eroista.Yksi tärkeimmistä tavoista, joilla ympäristö vaikuttaa lääkeaineiden laatuun, on kohdistamalla stressiä lähdekasveihin. Kohtuullinen ympäristöstressi yleensä stimuloi sekundääristen metaboliittien kertymistä [12,13Kasvu-/erilaistumistasapainohypoteesin mukaan kasvit ensisijaisesti kasvavat, kun ravinteita on riittävästi, kun taas ravinteiden ollessa puutteellisia kasvit pääasiassa erilaistuvat ja tuottavat enemmän sekundaarisia metaboliitteja [14Veden puutteesta johtuva kuivuusstressi on tärkein ympäristöstressi, jota kasvit kohtaavat kuivilla alueilla. Tässä tutkimuksessa viljellyn jasmiinin veden saanti on runsaampaa, ja vuotuinen sademäärä on huomattavasti korkeampi kuin villin jasmiinin (viljellyn jasmiinin veden saanti oli noin kaksi kertaa suurempi kuin villin jasmiinin noin 3,5 kertaa suurempi kuin villin). Lisäksi villin ympäristön maaperä on hiekkamaata, kun taas viljelysmaan maaperä on savimaata. Savimaahan verrattuna hiekkamaalla on huono vedenpidätyskyky ja se todennäköisemmin pahentaa kuivuusstressiä. Samaan aikaan viljelyprosessiin liittyi usein kastelua, joten kuivuusstressi oli alhainen. Villi jasmiini kasvaa ankarissa luonnonmukaisissa ja kuivissa elinympäristöissä, ja siksi se voi kärsiä vakavammasta kuivuusstressistä.Osmosäätely on tärkeä fysiologinen mekanismi, jolla kasvit selviytyvät kuivuusstressistä, ja alkaloidit ovat tärkeitä osmoottisia säätelijöitä korkeammissa kasveissa [15Betaiinit ovat vesiliukoisia alkaloidikvaternaarisia ammoniumyhdisteitä ja voivat toimia osmoprotektantteina. Kuivuusstressi voi vähentää solujen osmoottista potentiaalia, kun taas osmoprotektantit säilyttävät ja ylläpitävät biologisten makromolekyylien rakennetta ja eheyttä sekä lievittävät tehokkaasti kuivuusstressin kasveille aiheuttamia vaurioita [16Esimerkiksi kuivuusstressin aikana sokerijuurikkaan ja lycium barbarumin betaiinipitoisuus kasvoi merkittävästi [17,18Trigonelliini on solukasvun säätelijä, ja kuivuusstressin aikana se voi pidentää kasvin solusykliä, estää solukasvua ja johtaa solun tilavuuden pienenemiseen. Solun liuenneen aineen pitoisuuden suhteellinen kasvu mahdollistaa kasvin osmoottisen säätelyn ja parantaa sen kykyä vastustaa kuivuusstressiä [19]. JIA X [20] havaitsivat, että kuivuusstressin lisääntyessä Astragalus membranaceus (perinteisen kiinalaisen lääketieteen lähde) tuotti enemmän trigonelliinia, joka säätelee osmoottista potentiaalia ja parantaa kykyä vastustaa kuivuusstressiä. Flavonoidien on myös osoitettu olevan tärkeässä roolissa kasvien kuivuusstressin vastustuskyvyssä [21,22Useat tutkimukset ovat vahvistaneet, että kohtalainen kuivuusstressi oli suotuisa flavonoidien kertymiselle. Lang Duo-Yong ym. [23] vertailivat kuivuusstressin vaikutuksia YCH:hon säätelemällä vedenpidätyskykyä pellolla. Havaittiin, että kuivuusstressi esti juurien kasvua jossain määrin, mutta kohtalaisessa ja vakavassa kuivuusstressissä (40 % pellon vedenpidätyskyvystä) YCH:n kokonaisflavonoidipitoisuus lisääntyi. Samaan aikaan kuivuusstressin aikana fytosterolit voivat toimia säätelemällä solukalvon juoksevuutta ja läpäisevyyttä, estämällä veden menetystä ja parantamalla stressinsietokykyä [24,25Siksi flavonoidien, sterolien, betaiinin, trigonelliinin ja muiden sekundaaristen metaboliittien lisääntynyt kertyminen villiin YCH:hon saattaa liittyä voimakkaaseen kuivuusstressiin.Tässä tutkimuksessa suoritettiin KEGG-reitin rikastusanalyysi metaboliiteille, joiden havaittiin olevan merkittävästi erilaisia villin ja viljellyn YCH:n välillä. Rikastettuihin metaboliitteihin kuuluivat ne, jotka osallistuvat askorbaatin ja aldaraatin aineenvaihduntaan, aminoasyyli-tRNA:n biosynteesiin, histidiinin aineenvaihduntaan ja beeta-alaniinin aineenvaihduntaan. Nämä aineenvaihduntareitit liittyvät läheisesti kasvien stressinsietomekanismeihin. Näistä askorbaatin aineenvaihdunnalla on tärkeä rooli kasvien antioksidanttien tuotannossa, hiili- ja typpiaineenvaihdunnassa, stressinsietokyvyssä ja muissa fysiologisissa toiminnoissa [26]; aminoasyyli-tRNA:n biosynteesi on tärkeä proteiinien muodostumisreitti [27,28], joka osallistuu stressiä sietävien proteiinien synteesiin. Sekä histidiini- että β-alaniinireitit voivat parantaa kasvien sietokykyä ympäristöstressille [29,30Tämä osoittaa edelleen, että villin ja viljellyn YCH:n metaboliittien erot liittyivät läheisesti stressinsietokykyyn.Maaperä on lääkekasvien kasvun ja kehityksen aineellinen perusta. Maaperän typpi (N), fosfori (P) ja kalium (K) ovat tärkeitä ravinteita kasvien kasvulle ja kehitykselle. Maaperän orgaaninen aines sisältää myös N:ää, P:tä, K:ta, Zn:ää, Ca:ta, Mg:a sekä muita lääkekasvien tarvitsemia makro- ja hivenaineita. Liialliset tai puutteelliset ravinteet tai epätasapainoiset ravinnesuhteet vaikuttavat lääkekasvien kasvuun ja kehitykseen sekä laatuun, ja eri kasveilla on erilaiset ravinnetarpeet [31,32,33Esimerkiksi alhainen typpistressi edisti alkaloidien synteesiä Isatis indigotica -kasvissa ja oli hyödyllinen flavonoidien kertymiselle kasveissa, kuten Tetrastigma hemsleyanum, Crataegus pinnatifida Bunge ja Dichondra repens Forst. Sitä vastoin liian suuri typpipitoisuus esti flavonoidien kertymistä lajeissa, kuten Erigeron breviscapus, Abrus cantoniensis ja Ginkgo biloba, ja vaikutti lääkeaineiden laatuun [34Fosforilannoitteen käyttö lisäsi tehokkaasti glykyrritsiinihapon ja dihydroasetonin pitoisuuksia uralilakritsissa [35Kun levitetty määrä ylitti 0,12 kg·m−2, Tussilago farfaran kokonaisflavonoidipitoisuus laski [36Fosforilannoitteen käyttö vaikutti negatiivisesti polysakkaridien pitoisuuteen perinteisen kiinalaisen lääketieteen mukaisessa rhizoma polygonatissa [37], mutta K-lannoite lisäsi tehokkaasti sen saponiinipitoisuutta [38450 kg·hm−2 K -lannoitteen käyttö oli paras kaksivuotiaan Panax notoginsengin kasvulle ja saponiinien kertymiselle [39]. N:P:K-suhteen ollessa 2:2:1 hydrotermisen uutteen, harpagidin ja harpagosidin kokonaismäärät olivat suurimmat [40Korkea typen, fosforin ja kaliumin suhde edisti Pogostemon cablinin kasvua ja lisäsi haihtuvien öljyjen pitoisuutta. Alhainen typen, fosforin ja kaliumin suhde lisäsi Pogostemon cablinin varsilehtiöljyn tärkeimpien tehokkaiden komponenttien pitoisuuksia [41YCH on karua maaperää sietävä kasvi, ja sillä saattaa olla erityisvaatimuksia ravinteille, kuten typellelle, fosforille ja kaliumille. Tässä tutkimuksessa villien YCH-kasvien maaperä oli suhteellisen karu verrattuna viljeltyyn YCH:hon: maaperän orgaanisen aineksen, kokonaistypen, kokonaisfosforin ja kokonaiskaliumin pitoisuudet olivat noin 1/10, 1/2, 1/3 ja 1/3 viljeltyjen kasvien pitoisuuksista. Siksi maaperän ravinteiden erot voivat olla toinen syy viljellyn ja villin YCH:n metaboliittien välisille eroille. Weibao Ma ym.42] havaitsi, että tietyn määrän typpi- ja fosforilannoitteiden käyttö paransi merkittävästi siementen satoa ja laatua. Ravinteiden vaikutus lannoitteen laatuun ei kuitenkaan ole selvä, ja lääkeaineiden laadun parantamiseen tähtääviä lannoitustoimenpiteitä on tutkittava lisää.Kiinalaisilla rohdosvalmisteilla on seuraavat ominaisuudet: "Suotuisat elinympäristöt lisäävät satoa ja epäsuotuisat elinympäristöt parantavat laatua".43]. Villikasvien viljelyyn siirtymisen asteittaisessa prosessissa kasvien elinympäristö muuttui kuivalta ja karulta aavikkoarolta hedelmälliseksi viljelysmaaksi, jossa oli runsaammin vettä. Viljeltyjen viljelykasvien elinympäristö on parempi ja sato on suurempi, mikä auttaa vastaamaan markkinoiden kysyntään. Tämä parempi elinympäristö johti kuitenkin merkittäviin muutoksiin viljelykasvien metaboliiteissa; vaatii lisätutkimusta, parantaako tämä viljelykasvien laatua ja miten tieteellisesti perustuvien viljelymenetelmien avulla voidaan saavuttaa korkealaatuinen viljelykasvien tuotanto.Simuloiva elinympäristöviljely on menetelmä, jolla simuloidaan luonnonvaraisten lääkekasvien elinympäristöä ja ympäristöolosuhteita ja joka perustuu tietoon kasvien pitkäaikaisesta sopeutumisesta tiettyihin ympäristöstresseihin.43Simuloimalla erilaisia ympäristötekijöitä, jotka vaikuttavat luonnonkasveihin, erityisesti aitojen lääkeaineiden lähteinä käytettyjen kasvien alkuperäiseen elinympäristöön, lähestymistapa hyödyntää tieteellistä suunnittelua ja innovatiivisia ihmisen toimia kiinalaisten lääkekasvien kasvun ja toissijaisen aineenvaihdunnan tasapainottamiseksi [43Menetelmien tavoitteena on saavuttaa optimaaliset järjestelyt korkealaatuisten lääkemateriaalien kehittämiseksi. Simulatiivisen elinympäristöviljelyn tulisi tarjota tehokas tapa korkealaatuiseen YCH:n tuotantoon, vaikka farmakodynaaminen perusta, laatumerkit ja vastemekanismit ympäristötekijöihin olisivat epäselviä. Tämän vuoksi ehdotamme, että YCH:n viljelyn ja tuotannon tieteellinen suunnittelu ja kenttätyö tulisi suorittaa ottaen huomioon villin YCH:n ympäristöominaisuudet, kuten kuiva, karu ja hiekkainen maaperä. Samalla toivotaan myös, että tutkijat tekevät perusteellisempaa tutkimusta YCH:n toiminnallisesta materiaalipohjasta ja laatumerkeistä. Nämä tutkimukset voivat tarjota tehokkaampia YCH:n arviointikriteerejä ja edistää korkealaatuista tuotantoa ja alan kestävää kehitystä. -
Yrttiperäinen Fructus Amomi -öljy Luonnollinen hierontadiffuusori 1 kg Irtotavarana Amomum villosum -eteerinen öljy
Zingiberaceae-heimoon kuuluvat kasvit ovat herättäneet yhä enemmän huomiota allelopaattisessa tutkimuksessa niiden lajien runsaiden haihtuvien öljyjen ja aromaattisten ominaisuuksien vuoksi. Aiempi tutkimus oli osoittanut, että Curcuma zedoaria (zedoary) -kasvin kemikaalit [40], Alpinia zerumbet (Pers.) BLBurtt & RMSm. [41] ja Zingiber officinale Rosc. [42] inkiväärikasvien heimoon kuuluvilla öljyillä on allelopaattisia vaikutuksia maissin, salaatin ja tomaatin siementen itämiseen ja taimien kasvuun. Nykyinen tutkimuksemme on ensimmäinen raportti A. villosumin (Zingiberaceae-heimon jäsen) varsista, lehdistä ja nuorista hedelmistä peräisin olevien haihtuvien aineiden allelopaattisesta aktiivisuudesta. Varsien, lehtien ja nuorten hedelmien öljysaanto oli vastaavasti 0,15 %, 0,40 % ja 0,50 %, mikä osoittaa, että hedelmät tuottivat suuremman määrän haihtuvia öljyjä kuin varret ja lehdet. Varsien haihtuvien öljyjen pääkomponentit olivat β-pineeni, β-fellandreeni ja α-pineeni, mikä oli samanlainen kaava kuin lehtiöljyn pääkemikaaleilla, β-pineenillä ja α-pineenillä (monoterpeenihiilivedyt). Toisaalta nuorten hedelmien öljy oli runsaasti bornyyliasetaattia ja kamferia (hapettuneita monoterpeenejä). Tuloksia tukivat Do N Dain havainnot [30,32] ja Hui Ao [31], joka oli tunnistanut A. villosumin eri elimistä peräisin olevat öljyt.
Näiden pääyhdisteiden kasvien kasvua estävistä vaikutuksista muissa lajeissa on tehty useita raportteja. Shalinder Kaur havaitsi, että eukalyptuksesta peräisin oleva α-pineeni vähensi merkittävästi Amaranthus viridis L.:n juuren pituutta ja verson korkeutta 1,0 μl:n pitoisuudella [43], ja toinen tutkimus osoitti, että α-pineeni esti varhaista juurien kasvua ja aiheutti oksidatiivisia vaurioita juurikudoksessa lisäämällä reaktiivisten happilajien muodostumista [44Joissakin raporteissa on väitetty, että β-pineeni esti testirikkaruohojen itämistä ja taimien kasvua annoksesta riippuvalla tavalla häiritsemällä kalvon eheyttä [45], muuttamalla kasvien biokemiaa ja tehostamalla peroksidaasien ja polyfenolioksidaasien aktiivisuutta [46β-fellandreenilla oli maksimaalinen estovaikutus Vigna unguiculata (L.) Walpin itämiseen ja kasvuun 600 ppm:n pitoisuudella [47], kun taas 250 mg/m3:n pitoisuudella kamferi esti Lepidium sativum L.:n juurikasvien ja versojen kasvua. [48Bornyyliasetaatin allelopaattista vaikutusta käsittelevää tutkimusta on kuitenkin niukasti. Tutkimuksessamme β-pineenin, bornyyliasetaatin ja kamferin allelopaattiset vaikutukset juuren pituuteen olivat heikompia kuin haihtuvien öljyjen, lukuun ottamatta α-pineeniä, kun taas α-pineenipitoinen lehtiöljy oli myös fytotoksisempi kuin vastaavat A. villosumin varsista ja hedelmistä peräisin olevat haihtuvat öljyt. Molemmat löydökset viittaavat siihen, että α-pineeni saattaa olla tärkeä kemikaali tämän lajin allelopatialle. Samaan aikaan tulokset viittasivat myös siihen, että jotkin hedelmäöljyn yhdisteet, joita ei ollut runsaasti, saattavat vaikuttaa fytotoksisen vaikutuksen syntymiseen, mikä vaatii lisätutkimuksia tulevaisuudessa.Normaaliolosuhteissa allelokemikaalien allelopaattinen vaikutus on lajikohtainen. Jiang ym. havaitsivat, että Artemisia sieversianan tuottama eteerinen öljy vaikutti voimakkaammin Amaranthus retroflexus L. -kasviin kuin Medicago sativa L.-, Poa annua L.- ja Pennisetum alopecuroides (L.) Spreng -kasviin. [49Toisessa tutkimuksessa Lavandula angustifolia Mill. -lajin haihtuva öljy aiheutti eriasteisia fytotoksisia vaikutuksia eri kasvilajeihin. Lolium multiflorum Lam. oli herkin akseptorilaji, jonka hypokotyylin ja radikaalin kasvu estyi 87,8 % ja 76,7 % vastaavasti 1 μl/ml öljyannoksella, mutta kurkun taimien hypokotyylin kasvuun se ei juurikaan vaikuttanut [20Tuloksemme osoittivat myös, että L. sativan ja L. perennen herkkyydessä A. villosumin haihtuville yhdisteille oli eroa.Saman lajin haihtuvat yhdisteet ja eteeriset öljyt voivat vaihdella määrällisesti ja/tai laadullisesti kasvuolosuhteiden, kasvinosien ja havaitsemismenetelmien vuoksi. Esimerkiksi eräässä raportissa osoitettiin, että pyranoidi (10,3 %) ja β-karyofylleeni (6,6 %) olivat Sambucus nigran lehdistä erittyvien haihtuvien yhdisteiden pääasialliset yhdisteet, kun taas bentsaldehydiä (17,8 %), α-bulneseenia (16,6 %) ja tetrakosaania (11,5 %) oli runsaasti lehdistä uutetuissa öljyissä [50Tutkimuksessamme tuoreiden kasvimateriaalien vapauttamilla haihtuvilla yhdisteillä oli voimakkaampia allelopaattisia vaikutuksia testikasveihin kuin uutetuilla haihtuvilla öljyillä, ja vasteen erot liittyivät läheisesti kahden valmisteen sisältämien allelokemikaalien eroihin. Haihtuvien yhdisteiden ja öljyjen välisiä tarkkoja eroja on tutkittava lisää seuraavissa kokeissa.Maaperänäytteiden, joihin oli lisätty haihtuvia öljyjä, mikrobien monimuotoisuuden ja yhteisörakenteen erot liittyivät mikro-organismien väliseen kilpailuun sekä mahdollisiin myrkyllisiin vaikutuksiin ja haihtuvien öljyjen kestoon maaperässä. Vokou ja Liotiri [51] havaittiin, että neljän eteerisen öljyn (0,1 ml) lisääminen viljeltyyn maaperään (150 g) aktivoi maaperänäytteiden hengitystä, jopa öljyjen kemiallinen koostumus erosi toisistaan, mikä viittaa siihen, että maaperässä esiintyvät mikro-organismit käyttävät kasviöljyjä hiilen ja energian lähteenä. Tässä tutkimuksessa saadut tiedot vahvistivat, että koko A. villosum -kasvista peräisin olevat öljyt vaikuttivat maaperän sienilajien määrän ilmeiseen kasvuun 14. päivään mennessä öljyn lisäämisen jälkeen, mikä viittaa siihen, että öljy voi tarjota hiilen lähteen useammille maaperän sienille. Toisessa tutkimuksessa raportoitiin löydös: maaperän mikro-organismit palauttivat alkuperäisen toimintansa ja biomassansa Thymbra capitata L. (Cav) -öljyn lisäämisen aiheuttaman tilapäisen vaihtelujakson jälkeen, mutta suurin öljyannos (0,93 µl öljyä per gramma maaperää) ei antanut maaperän mikro-organismien palauttaa alkuperäistä toimintakykyään [52]. Tässä tutkimuksessa, joka perustui maaperän mikrobiologiseen analyysiin eri päivien ja pitoisuuksien käsittelyn jälkeen, olettelimme, että maaperän bakteeriyhteisö toipuisi useiden päivien kuluttua. Sitä vastoin sienimikrobiota ei voi palata alkuperäiseen tilaansa. Seuraavat tulokset vahvistavat tämän hypoteesin: pääkoordinaattianalyysi (PCoA) paljasti öljyn korkean pitoisuuden selkeän vaikutuksen maaperän sienimikrobiomin koostumukseen, ja lämpökarttaesitykset vahvistivat jälleen, että 3,0 mg/ml öljyllä (eli 0,375 mg öljyä grammaa maaperää kohden) käsitellyn maaperän sieniyhteisön koostumus erosi huomattavasti suvustasolla muista käsittelyistä. Tällä hetkellä tutkimusta monoterpeenihiilivetyjen tai hapettuneiden monoterpeenien lisäämisen vaikutuksista maaperän mikrobien monimuotoisuuteen ja yhteisörakenteeseen on vielä niukasti. Muutamissa tutkimuksissa on raportoitu, että α-pineeni lisäsi maaperän mikrobiaktiivisuutta ja Methylophilaceae-bakteerien (metylotrofien ryhmä, proteobakteereja) suhteellista runsautta alhaisessa kosteuspitoisuudessa, ja sillä on tärkeä rooli hiilen lähteenä kuivemmissa maaperissä [53Samoin koko A. villosum -kasvin haihtuva öljy, joka sisältää 15,03 % α-pineeniä (Lisätaulukko S1) lisäsi selvästi proteobakteerien suhteellista runsautta pitoisuuksissa 1,5 mg/ml ja 3,0 mg/ml, mikä viittaa siihen, että α-pineeni saattaa toimia yhtenä maaperän mikro-organismien hiilenlähteistä.A. villosumin eri elinten tuottamilla haihtuvilla yhdisteillä oli vaihtelevassa määrin allelopaattisia vaikutuksia L. sativaan ja L. perenneen, mikä oli läheistä yhteyttä A. villosumin kasvinosien kemiallisiin ainesosiin. Vaikka haihtuvan öljyn kemiallinen koostumus vahvistettiin, A. villosumin huoneenlämmössä vapauttamat haihtuvat yhdisteet ovat tuntemattomia, ja ne vaativat lisätutkimuksia. Lisäksi eri allelokemikaalien välinen synergistinen vaikutus on myös huomionarvoinen. Maaperän mikro-organismien osalta, jotta haihtuvan öljyn vaikutusta maaperän mikro-organismeihin voidaan tutkia kattavasti, meidän on vielä tehtävä perusteellisempaa tutkimusta: pidennettävä haihtuvan öljyn käsittelyaikaa ja erotettava maaperän haihtuvan öljyn kemiallisen koostumuksen vaihtelut eri päivinä. -
Puhdas Artemisia capillaris -öljy kynttilän ja saippuan valmistukseen tukkumyyntidiffuusorin eteerinen öljy, uusi ruokolamppudiffuusoreille
Jyrsijämallin suunnittelu
Eläimet jaettiin satunnaisesti viiteen viidentoista hiiren ryhmään. Kontrolliryhmän ja malliryhmän hiirille annettiin letkuruokintaaseesamiöljy6 päivän ajan. Positiivisen kontrolliryhmän hiirille annettiin letkuruokintaa bifendaattitableteilla (BT, 10 mg/kg) 6 päivän ajan. Koeryhmille annettiin 100 mg/kg ja 50 mg/kg seesamiöljyyn liuotettua AEO:ta 6 päivän ajan. Päivänä 6 kontrolliryhmälle annettiin seesamiöljyä ja kaikille muille ryhmille kerta-annoksena 0,2 % CCl4:ää seesamiöljyssä (10 ml/kg)vatsaontelonsisäinen injektioHiiret pidettiin sitten paastossa ilman vettä ja verinäytteet kerättiin retrobulbaarisista suonista; kerätty veri sentrifugoitiin nopeudella 3000 ×g10 minuuttia seerumin erottamiseksi.Kohdunkaulan sijoiltaanmenosuoritettiin välittömästi verinäytteen ottamisen jälkeen, ja maksanäytteet poistettiin viipymättä. Yksi osa maksanäytteestä säilytettiin välittömästi −20 °C:ssa analyysiin asti, ja toinen osa leikattiin pois ja fiksoitiin 10 %:nformaliiniliuos; loput kudokset säilytettiin −80 °C:ssa histopatologista analyysiä varten (Wang ym., 2008,Hsu ym., 2009,Nie ym., 2015).
Seerumin biokemiallisten parametrien mittaus
Maksavaurio arvioitiin arvioimallaentsymaattiset aktiivisuudetSeerumin ALT- ja AST-pitoisuudet mitattiin vastaavilla kaupallisilla määrityspakkauksilla pakkauksen ohjeiden mukaisesti (Nanjing, Jiangsun maakunta, Kiina). Entsymaattiset aktiivisuudet ilmaistiin yksikköinä litraa kohti (U/l).
MDA:n, SOD:n, GSH:n ja GSH-P:n mittausxmaksahomogenaateissa
Maksakudokset homogenisoitiin kylmällä fysiologisella suolaliuoksella suhteessa 1:9 (w/v, maksa:suolaliuos). Homogenaatit sentrifugoitiin (2500 ×g10 min) supernatanttien keräämiseksi seuraavia määrityksiä varten. Maksavaurio arvioitiin maksan MDA- ja GSH-tasojen sekä SOD- ja GSH-P-tasojen mittausten perusteella.xaktiivisuudet. Kaikki nämä määritettiin pakkauksen ohjeiden mukaisesti (Nanjing, Jiangsun maakunta, Kiina). MDA:n ja GSH:n tulokset ilmaistiin nmol-arvoina mg proteiinia kohden (nmol/mg prot), ja SOD:n ja GSH-P:n aktiivisuudetxilmaistiin U-arvoina mg proteiinia kohden (U/mg prot).
Histopatologinen analyysi
Osia tuoreesta maksasta fiksoitiin 10-prosenttisesti puskuroituun liuokseen.paraformaldehydifosfaattiliuosta. Näyte upotettiin sitten parafiiniin, leikattiin 3–5 μm:n paloiksi ja värjättiinhematoksyliinijaeosiini(H&E) standardimenettelyn mukaisesti ja lopuksi analysoitunavalomikroskopia(Tian ym., 2012).
Tilastollinen analyysi
Tulokset ilmaistiin keskiarvona ± keskihajonta (SD). Tulokset analysoitiin tilasto-ohjelmalla SPSS Statistics, versio 19.0. Aineisto analysoitiin varianssianalyysillä (ANOVA,p< 0,05), minkä jälkeen Dunnettin testi ja Dunnettin T3-testi määrittivät tilastollisesti merkitsevät erot eri koeryhmien arvojen välillä. Merkitseväksi eroksi katsottiin tasop< 0,05.
Tulokset ja keskustelu
AEO-osapuolet
GC/MS-analyysissä AEO:n havaittiin sisältävän 25 ainesosaa eluoituna 10–35 minuutin aikana, ja 21 ainesosaa, jotka muodostavat 84 % eteerisestä öljystä, tunnistettiin (Taulukko 1). Haihtuva öljy sisälsimonoterpenoidit(80,9 %), seskviterpenoidit (9,5 %), tyydyttyneet haaroittumattomat hiilivedyt (4,86 %) ja sekalainen asetyleeni (4,86 %). Verrattuna muihin tutkimuksiin (Guo ym., 2004) löysimme AEO:sta runsaasti monoterpenoideja (80,90 %). Tulokset osoittivat, että AEO:n yleisin ainesosa on β-sitronelloli (16,23 %). Muita AEO:n pääkomponentteja ovat 1,8-kineoli (13,9 %),kamferi(12,59 %),linalooli(11,33 %), α-pineeni (7,21 %), β-pineeni (3,99 %),tymoli(3,22 %), jamyrseeni(2,02 %). Kemiallisen koostumuksen vaihtelu voi liittyä ympäristöolosuhteisiin, joille kasvi on altistunut, kuten kivennäisveteen, auringonvaloon, kehitysvaiheeseen jaravitsemus.
-
Puhdas Saposhnikovia divaricata -öljy kynttilän ja saippuan valmistukseen tukkumyyntidiffuusorin eteerinen öljy, uusi ruokolamppudiffuusoreille
2.1. SDE:n valmistelu
SD:n juurakot ostettiin kuivattuina yrtteinä Hanherb Co.:lta (Guri, Korea). Kasvimateriaalin taksonomisen varmisti tohtori Go-Ya Choi Korean itämaisen lääketieteen instituutista (KIOM). Yksi näytekappale (numero 2014 SDE-6) on talletettu Korean Herbarium of Standard Herbal Resources -kokoelmaan. Kuivattuja SD:n juurakoita (320 g) uutettiin kahdesti 70-prosenttisella etanolilla (2 tunnin refluksoinnilla) ja uute väkevöitiin sitten alennetussa paineessa. Keite suodatettiin, kylmäkuivattiin ja säilytettiin 4 °C:ssa. Kuivatun uutteen saanto raaka-aineista oli 48,13 % (p/p).
2.2. Kvantitatiivinen korkean suorituskyvyn nestekromatografia (HPLC) -analyysi
Kromatografinen analyysi suoritettiin HPLC-järjestelmällä (Waters Co., Milford, MA, USA) ja fotodiodirividetektorilla. SDE:n HPLC-analyysissä prim-O-glukosyylikimifugiinistandardi hankittiin Korea Promotion Institute for Traditional Medicine Industry -instituutilta (Gyeongsan, Korea), jasec-O-glukosyylihamaudoli ja 4′-O-β-D-glukosyyli-5-O-metyylivisamminoli eristettiin laboratoriossamme ja tunnistettiin spektrianalyyseillä, pääasiassa NMR:llä ja MS:llä.
SDE-näytteet (0,1 mg) liuotettiin 70-prosenttiseen etanoliin (10 ml). Kromatografinen erottelu suoritettiin XSelect HSS T3 C18 -kolonnilla (4,6 × 250 mm, 5μm, Waters Co., Milford, MA, USA). Liikkuva faasi koostui asetonitriilistä (A) ja 0,1 % etikkahaposta vedessä (B) virtausnopeudella 1,0 ml/min. Käytettiin monivaiheista gradienttiohjelmaa seuraavasti: 5 % A:ta (0 min), 5–20 % A:ta (0–10 min), 20 % A:ta (10–23 min) ja 20–65 % A:ta (23–40 min). Detektioaallonpituus skannattiin aallonpituudella 210–400 nm ja rekisteröitiin aallonpituudella 254 nm. Injektiotilavuus oli 10,0μL. Kolmen kromonin määrittämiseen tarkoitetut standardiliuokset valmistettiin lopulliseen pitoisuuteen 7,781 mg/ml (prim-O-glukosyylikimifugiini), 31,125 mg/ml (4′-)O-β-D-glukosyyli-5-O-metyylivisamminoli) ja 31,125 mg/ml (sec-O-glukosyylihamaudoli) metanolissa ja säilytetään 4 °C:ssa.
2.3. Tulehdusta estävän vaikutuksen arviointiIn vitro
2.3.1. Soluviljely ja näytteen käsittely
RAW 264.7 -solut saatiin American Type Culture Collectionista (ATCC, Manassas, VA, USA) ja niitä kasvatettiin DMEM-elatusaineessa, joka sisälsi 1 % antibiootteja ja 5,5 % FBS:ää. Soluja inkuboitiin kostutetussa 5 % CO2:ta sisältävässä ilmakehässä 37 °C:ssa. Solujen stimuloimiseksi elatusaine korvattiin tuoreella DMEM-elatusaineella ja lipopolysakkaridilla (LPS, Sigma-Aldrich Chemical Co., St. Louis, MO, USA) 1 %:ssa.μµg/ml lisättiin SDE:n läsnä ollessa tai ilman sitä (200 tai 400μg/ml) vielä 24 tunnin ajan.
2.3.2. Typpioksidin (NO), prostaglandiini E2:n (PGE2) ja tuumorinekroositekijän määritysα(TNF-α) ja interleukiini-6:n (IL-6) tuotanto
Soluja käsiteltiin SDE:llä ja stimuloitiin LPS:llä 24 tunnin ajan. NO-tuotantoa analysoitiin mittaamalla nitriitti Griessin reagenssilla aiemman tutkimuksen mukaisesti [12Tulehduksellisten sytokiinien PGE2:n, TNF:n eritysα, ja IL-6 määritettiin ELISA-kitillä (R&D systems) valmistajan ohjeiden mukaisesti. SDE:n vaikutukset NO:n ja sytokiinien tuotantoon määritettiin 540 nm:ssä tai 450 nm:ssä käyttäen Wallac EnVision -laitetta™mikrolevylukija (PerkinElmer).
2.4. Nivelrikon vastaisen vaikutuksen arviointiIn vivo
2.4.1. Eläimet
Urospuoliset Sprague-Dawley-rotat (7 viikon ikäiset) hankittiin Samtako Inc.:ltä (Osan, Korea) ja niitä pidettiin kontrolloiduissa olosuhteissa 12 tunnin valo-/pimeäsyklin avulla°C ja% ilmankosteutta. Rotille annettiin laboratorioruokaa ja vettärajoittamattomastiKaikki kokeelliset toimenpiteet suoritettiin Yhdysvaltain kansallisten terveyslaitosten (NIH) ohjeiden mukaisesti ja Daejeonin yliopiston (Daejeon, Korean tasavalta) eläintenhoito- ja käyttökomitea hyväksyi ne.
2.4.2. OA:n indusointi MIA:lla rotilla
Eläimet satunnaistettiin ja jaettiin hoitoryhmiin ennen tutkimuksen aloittamista (ryhmää kohden). MIA-liuos (3 mg/50μOikean polven niveltilaan injektoitiin 0,9-prosenttista keittosuolaliuosta suoraan ketamiinin ja ksylatsiinin seoksella indusoidun anestesian alaisena. Rotat jaettiin satunnaisesti neljään ryhmään: (1) keittosuolaliuosryhmä, jolle ei annettu MIA-injektiota, (2) MIA-ryhmä, jolle annettiin MIA-injektiota, (3) SDE-hoitoa saanut ryhmä (200 mg/kg) MIA-injektiolla ja (4) indometasiinia (IM) saanut ryhmä (2 mg/kg) MIA-injektiolla. Rotille annettiin SDE:tä ja IM:ää suun kautta viikkoa ennen MIA-injektiota neljän viikon ajan. Tässä tutkimuksessa käytetty SDE- ja IM-annos perustui aiemmissa tutkimuksissa käytettyihin annostusiin [10,13,14].
2.4.3. Takakäpälien painonjakauman mittaukset
Nivelrikon induktion jälkeen takakäpälien alkuperäinen tasapaino painonkantokyvyssä häiriintyi. Painonkantokyvyn muutosten arvioimiseksi käytettiin toimintakyvyttömyysmittaria (Linton instrumentation, Norfolk, Iso-Britannia). Rotat asetettiin varovasti mittauskammioon. Takaraajan painonkantovoima laskettiin keskiarvona 3 sekunnin ajalta. Painon jakautumissuhde laskettiin seuraavalla yhtälöllä: [oikean takaraajan paino / (oikean takaraajan paino + vasemman takaraajan paino)] × 100 [15].
2.4.4. Seerumin sytokiinitasojen mittaukset
Verinäytteet sentrifugoitiin 1 500 g:n voimalla 10 minuutin ajan 4 °C:ssa; sitten seerumi kerättiin ja säilytettiin −70 °C:ssa käyttöön asti. IL-1-pitoisuudetβ, IL-6, TNF-αja PGE2 seerumissa mitattiin R&D Systemsin (Minneapolis, MN, USA) ELISA-kittien avulla valmistajan ohjeiden mukaisesti.
2.4.5. Reaaliaikainen kvantitatiivinen RT-PCR-analyysi
Kokonais-RNA eristettiin polvinivelkudoksesta käyttämällä TRI-reagenssia® (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA), käänteiskopioitiin cDNA:ksi ja PCR-amplifioitiin käyttämällä TM One Step RT PCR -kittiä ja SYBR green -väriainetta (Applied Biosystems, Grand Island, NY, USA). Reaaliaikainen kvantitatiivinen PCR suoritettiin käyttämällä Applied Biosystems 7500 Real-Time PCR -järjestelmää (Applied Biosystems, Grand Island, NY, USA). Alukesekvenssit ja koetinsekvenssi on esitetty taulukossa.1Näyte-cDNA:n alikvootit ja yhtä suuri määrä GAPDH-cDNA:ta monistettiin TaqMan® Universal PCR -pääseoksella, joka sisälsi DNA-polymeraasia valmistajan ohjeiden mukaisesti (Applied Biosystems, Foster, CA, USA). PCR-olosuhteet olivat 2 minuuttia 50 °C:ssa, 10 minuuttia 94 °C:ssa, 15 sekuntia 95 °C:ssa ja 1 minuutti 60 °C:ssa 40 syklin ajan. Kohdegeenin pitoisuus määritettiin käyttämällä vertailevaa Ct-menetelmää (kynnyssyklien lukumäärä monistuskuvaajan ja kynnysarvon risteyspisteessä) valmistajan ohjeiden mukaisesti.
