-
Kylmäpuristettu luomu jojobaöljy jojoban siemenöljy ihonhoitoon hierontaan
Luonnollisen jojobaöljyn pääaineosat ovat palmitiinihappo, erukkihappo, öljyhappo ja gadolihappo. Jojobaöljy sisältää myös runsaasti vitamiineja, kuten E-vitamiinia ja B-vitamiinikompleksia.
Jojoba-kasvin nestemäinen kasvivaha on väriltään kullankeltaista. Jojoba-yrttiöljyllä on tyypillinen pähkinäinen aromi, ja se on suositeltava lisä Personal Care -tuotteisiin, kuten voiteisiin, meikkiin, shampoon jne. Jojoba-yrttiöljyä voidaan levittää suoraan iholle auringonpolttaman, psoriaasin ja aknen hoitoon. Puhdas jojobaöljy edistää myös hiusten kasvua.
-
Luonnollinen puhdas orgaaninen laventelin eteerinen öljy aromaterapia-ihonhoitoon
Uutto- tai käsittelymenetelmä: Höyrytislattu
Tislausuutto-osa: Kukka
Maan alkuperä: Kiina
Käyttö: Diffuusi/aromaterapia/hieronta
Säilyvyys: 3 vuotta
Räätälöity palvelu: mukautettu etiketti ja laatikko tai vaatimuksesi mukaan
Sertifiointi: GMPC/FDA/ISO9001/MSDS/COA
-
100 % puhdasta luonnollista luonnonmukaista Magnoliae Officmalis Cortex Oil -eteeristä öljyä ihonhoitoon
Hou Po:n tuoksu on välittömästi katkera ja jyrkästi pistävä ja sitten vähitellen avautuu syvällä, siirappimaisella makeudella ja lämmöllä.
Hou Po:n affiniteetti on maa- ja metallielementteihin, joissa sen katkera lämpö vaikuttaa voimakkaasti laskeen Qi:tä ja kuivaa kosteutta. Näiden ominaisuuksien vuoksi sitä käytetään kiinalaisessa lääketieteessä lievittämään stagnaatiota ja kertymistä ruoansulatuskanavassa sekä yskää ja hengityksen vinkumista, joka johtuu keuhkoja tukkivasta limasta.
Magnolia Officinials on lehtipuu, joka on kotoisin Sichuanin, Hubein ja muiden Kiinan maakuntien vuorista ja laaksoista. Perinteisessä kiinalaisessa lääketieteessä käytetty erittäin aromaattinen kuori irrotetaan varresta, oksista ja juurista. Kerätään huhti-kesäkuussa. Paksu, sileä kuori, raskas öljyinen, on väriltään purppurainen sisäpuolella ja kristallin kiiltävä.
Ammatinharjoittajat voivat harkita Hou Po:n yhdistämistä Qing Pi:n eteeriseen öljyyn huippusuunnikkeena sekoituksissa, joiden tarkoituksena on hajottaa kertymiä.
-
OEM Custom Package Natural Macrocephalae Rhizoma -öljy
Tehokkaana kemoterapeuttisena aineena 5-fluorourasiilia (5-FU) käytetään laajalti pahanlaatuisten kasvainten hoitoon maha-suolikanavassa, päässä, kaulassa, rinnassa ja munasarjoissa. Ja 5-FU on ensilinjan lääke kolorektaalisyövän hoitoon klinikalla. 5-FU:n toimintamekanismi on estää urasiilinukleiinihapon transformaatio tymiininukleiinihapoksi kasvainsoluissa ja vaikuttaa sitten DNA:n ja RNA:n synteesiin ja korjaamiseen sytotoksisen vaikutuksen saavuttamiseksi (Afzal et al., 2009; Ducreux et al. ai., 2015; Longley et ai., 2003). 5-FU aiheuttaa kuitenkin myös kemoterapian aiheuttamaa ripulia (CID), joka on yksi yleisimmistä haittavaikutuksista, joka vaivaa monia potilaita (Filho et al., 2016). Ripulin ilmaantuvuus 5-FU:lla hoidetuilla potilailla oli jopa 50–80 %, mikä vaikutti vakavasti kemoterapian etenemiseen ja tehokkuuteen (Iacovelli et al., 2014; Rosenoff et al., 2006). Näin ollen on erittäin tärkeää löytää tehokas hoito 5-FU:n aiheuttamalle CID:lle.
Tällä hetkellä CID:n kliiniseen hoitoon on tuotu ei-lääkkeitä ja lääkeinterventioita. Ei-huumetoimenpiteitä ovat kohtuullinen ruokavalio ja lisäravinteet suolalla, sokerilla ja muilla ravintoaineilla. Huumeita, kuten loperamidia ja oktreotidia, käytetään yleisesti CID:n ripulin vastaisessa hoidossa (Benson et ai., 2004). Lisäksi etnolääkkeitä käytetään myös CID:n hoitoon omalla ainutlaatuisella terapiallaan eri maissa. Perinteinen kiinalainen lääketiede (TCM) on yksi tyypillinen etnomelääketiede, jota on harjoitettu yli 2000 vuoden ajan Itä-Aasian maissa, mukaan lukien Kiinassa, Japanissa ja Koreassa (Qi et al., 2010). TCM katsoo, että kemoterapeuttiset lääkkeet aiheuttaisivat Qi:n kulutuksen, pernan puutteen, mahalaukun epäharmoniaa ja endofyyttistä kosteutta, mikä johtaisi suoliston johtavaan toimintahäiriöön. TCM-teoriassa CID:n hoitostrategian tulisi olla pääasiassa riippuvainen Qi:n täydentämisestä ja pernan vahvistamisesta (Wang et ai., 1994).
Kuivatut juuretAtractylodes macrocephalaKoidz. (AM) jaPanax ginsengCA Mey. (PG) ovat tyypillisiä TCM:n kasviperäisiä lääkkeitä, joilla on samat vaikutukset, jotka täydentävät Qi:tä ja vahvistavat pernaa (Li et al., 2014). AM:tä ja PG:tä käytetään yleensä yrttiparina (yksinkertaisin kiinalaisen yrttiyhteensopivuuden muoto), ja ne täydentävät Qi:tä ja vahvistavat pernaa ripulin hoidossa. Esimerkiksi AM ja PG dokumentoitiin klassisissa ripulin vastaisissa kaavoissa, kuten Shen Ling Bai Zhu San, Si Jun Zi TangTaiping Huimin Heji Ju Fang(Song-dynastia, Kiina) ja Bu Zhong Yi Qi Tang alkaenPi Wei Lun(Yuan-dynastia, Kiina) (Kuva 1). Useat aiemmat tutkimukset ovat raportoineet, että kaikilla kolmella kaavoilla on kyky lievittää CID:tä (Bai et al., 2017; Chen et al., 2019; Gou et al., 2016). Lisäksi edellinen tutkimuksemme osoitti, että Shenzhu-kapselilla, joka sisältää vain AM:a ja PG:tä, on potentiaalisia vaikutuksia ripulin, paksusuolentulehduksen (xiexie-oireyhtymän) ja muiden ruoansulatuskanavan sairauksien hoidossa (Feng et al., 2018). Missään tutkimuksessa ei kuitenkaan ole käsitelty AM:n ja PG:n vaikutusta ja mekanismia CID:n hoidossa, joko yhdistelmänä tai yksinään.
Nyt suoliston mikrobiotan katsotaan olevan mahdollinen tekijä TCM:n terapeuttisen mekanismin ymmärtämisessä (Feng et al., 2019). Nykyaikaiset tutkimukset osoittavat, että suoliston mikrobiotalla on ratkaiseva rooli suoliston homeostaasin ylläpitämisessä. Terve suoliston mikrobiota edistää suoliston limakalvon suojaa, aineenvaihduntaa, immuunijärjestelmän homeostaasia ja vastetta sekä patogeenien suppressiota (Thursby ja Juge, 2017; Pickard et al., 2017). Suoliston mikrobisto heikentää suoraan tai epäsuorasti ihmiskehon fysiologisia ja immuunitoimintoja aiheuttaen sivureaktioita, kuten ripulia (Patel et al., 2016; Zhao ja Shen, 2010). Tutkimukset ovat osoittaneet, että 5-FU muutti merkittävästi suoliston mikrobiston rakennetta ripulisilla hiirillä (Li et al., 2017). Siksi suoliston mikrobiota voi välittää AM:n ja PM:n vaikutukset 5-FU:n aiheuttamaan ripuliin. Vielä ei kuitenkaan tiedetä, voisivatko AM ja PG yksinään ja yhdessä estää 5-FU:n aiheuttamaa ripulia moduloimalla suoliston mikrobiota.
AM:n ja PG:n ripulin vastaisten vaikutusten ja taustalla olevien mekanismien tutkimiseksi käytimme 5-FU:ta simuloimaan ripulimallia hiirillä. Tässä keskityimme yksittäisen ja yhdistetyn annon (AP) mahdollisiin vaikutuksiinAtractylodes macrocephalaeteerinen öljy (AMO) jaPanax ginsengkokonaissaponiinit (PGS), aktiiviset komponentit, jotka on uutettu vastaavasti AM:stä ja PG:stä, ripuliin, suoliston patologiaan ja mikrobien rakenteeseen 5-FU-kemoterapian jälkeen.
-
100 % puhdas luonnollinen Eucommiae Foliuml Oil eteerinen öljy ihonhoitoon
Eucommia ulmoides(EU) (tunnetaan yleisesti nimellä "Du Zhong" kiinan kielellä) kuuluvat Eucommiaceae-heimoon, joka on Keski-Kiinasta kotoisin oleva pieni puu.1]. Tätä kasvia viljellään laajalti Kiinassa suuressa mittakaavassa sen lääketieteellisen merkityksen vuoksi. EU:sta on eristetty noin 112 yhdistettä, joihin kuuluvat lignaanit, iridoidit, fenolit, steroidit ja muut yhdisteet. Tämän kasvin täydentävät yrtit (kuten herkullinen tee) ovat osoittaneet joitain lääkinnällisiä ominaisuuksia. EU:n lehdillä on suurempi aktiivisuus aivokuoreen, kukkaan ja hedelmiin liittyen [2,3]. EU:n lehtien on raportoitu lisäävän luuston voimaa ja kehon lihaksia [4], mikä johtaa pitkäikäisyyteen ja edistää ihmisten hedelmällisyyttä [5]. EU:n lehdistä valmistetun herkullisen teekaavan kerrottiin vähentävän rasvaisuutta ja tehostavan energia-aineenvaihduntaa. Flavonoidiyhdisteiden (kuten rutiinin, klorogeenihapon, ferulihapon ja kofeiinihapon) on raportoitu osoittavan antioksidanttista aktiivisuutta EU:n lehdissä [6].
Vaikka EU:n fytokemiallisista ominaisuuksista on ollut riittävästi kirjallisuutta, EU:n kuorista, siemenistä, varresta ja lehdistä uutettujen erilaisten yhdisteiden farmakologisista ominaisuuksista oli kuitenkin vain vähän tutkimuksia. Tämä tarkasteluasiakirja selventää yksityiskohtaista tietoa eri yhdisteistä, jotka on uutettu EU:n eri osista (kuoret, siemenet, varsi ja lehdet) ja näiden yhdisteiden mahdollisia käyttötarkoituksia terveyttä edistäviin ominaisuuksiin tieteellisten todisteiden avulla ja tarjoaa siten vertailumateriaalia. EU:n soveltamista varten.
-
Puhdas luonnollinen Houttuynia cordata öljy Houttuynia Cordata Oil Lchthammolum Oil
Useimmissa kehitysmaissa 70–95 % väestöstä käyttää perinteisiä lääkkeitä perusterveydenhuollossa, ja näistä 85 % ihmisistä käyttää kasveja tai niiden uutteita vaikuttavana aineena.1] Uusien biologisesti aktiivisten yhdisteiden etsiminen kasveista riippuu yleensä paikallisilta toimijoilta saaduista etnisistä ja kansantasaisista tiedoista, ja sitä pidetään edelleen tärkeänä lääkekehityksen lähteenä. Intiassa noin 2000 lääkettä on kasviperäisiä.2] Kun otetaan huomioon laaja kiinnostus lääkekasvien käyttöä kohtaan, tämä katsaus onHouttuynia cordataThunb. tarjoaa ajankohtaista tietoa kirjallisuudessa esiintyvistä kasvitieteellisistä, kaupallisista, etnofarmakologisista, fytokemiallisista ja farmakologisista tutkimuksista.H. cordataThunb. kuuluu perheeseenSaururaceaeja tunnetaan yleisesti kiinalaiskon hännänä. Se on monivuotinen yrtti, jossa on stoloniferous juurakkoa, jolla on kaksi erilaista kemotyyppiä.3,4] Lajin kiinalaista kemotyyppiä tavataan luonnonvaraisissa ja puolivilliseissä olosuhteissa Koillis-Intiassa huhtikuusta syyskuuhun.[5,6,7]H. cordataon saatavilla Intiassa, erityisesti Assamin Brahmaputran laaksossa, ja useat Assamin heimot käyttävät sitä vihannesten muodossa sekä erilaisiin lääketieteellisiin tarkoituksiin perinteisesti.
-
100 % PureArctium lappaöljy Valmistaja – Natural Lime Arctium lappaöljy laadunvarmistussertifikaateilla
Terveyshyödyt
Takiaisen juuria syödään usein, mutta sen voi myös kuivata ja liottaa teessä. Se toimii hyvin inuliinin lähteenä, aprebioottikuitua, joka edistää ruoansulatusta ja parantaa suoliston terveyttä. Lisäksi tämä juuri sisältää flavonoideja (kasviravinteita),fytokemikaalitja antioksidantteja, joilla tiedetään olevan terveyshyötyjä.
Lisäksi takiainen juuri voi tarjota muita etuja, kuten:
Vähentää kroonista tulehdusta Takiaisen juuri sisältää useita antioksidantteja, kuten kversetiiniä, fenolihappoja ja luteoliinia, jotka voivat auttaa suojaamaan solujasivapaat radikaalit. Nämä antioksidantit auttavat vähentämään tulehdusta koko kehossa.
Terveysriskit
Takiaisen juuria pidetään turvallisena syödä tai juoda teenä. Tämä kasvi muistuttaa kuitenkin läheisesti belladonna-yökirjokasveja, jotka ovat myrkyllisiä. On suositeltavaa ostaa takiaisen juuria vain luotettavilta myyjiltä ja pidättäytyä keräämästä sitä itse. Lisäksi sen vaikutuksista lapsille tai raskaana oleville naisille on vain vähän tietoa. Keskustele lääkärisi kanssa ennen kuin käytät takiaisen juuria lasten kanssa tai jos olet raskaana.
Tässä on joitain muita mahdollisia terveysriskejä, jotka on otettava huomioon, jos käytät takiaisjuurta:
Lisääntynyt nestehukka
Takiainen juuri toimii kuin luonnollinen diureetti, mikä voi johtaa kuivumiseen. Jos otat vesipillereitä tai muita diureetteja, älä ota takiaisjuurta. Jos käytät näitä lääkkeitä, on tärkeää olla tietoinen muista lääkkeistä, yrteistä ja ainesosista, jotka voivat johtaa kuivumiseen.
Allerginen reaktio
Jos olet herkkä tai sinulla on aiemmin ollut allergisia reaktioita koiranputkelle, tuoksulle tai krysanteemille, sinulla on suurempi riski saada allerginen reaktio takiaisen juurille.
-
Tukku bulkkihinta 100 % puhdas AsariRadix Et Rhizoma öljy Relax Aromatherapy Eucalyptus globulus
Eläin- ja in vitro -tutkimukset ovat tutkineet sassafrasin ja sen komponenttien mahdollisia antifungaalisia, anti-inflammatorisia ja kardiovaskulaarisia vaikutuksia. Kliinisiä tutkimuksia ei kuitenkaan ole tehty, eikä sassafrasia pidetä turvallisina. Yhdysvaltain elintarvike- ja lääkevirasto (FDA) on kieltänyt safrolin, joka on sassafrasjuuren kuoren ja öljyn pääainesosa, myös aromi- tai tuoksuaineena, eikä sitä saa käyttää sisäisesti tai ulkoisesti, koska se on mahdollisesti syöpää aiheuttava. Safrolia on käytetty 3,4-metyleenidioksimetamfetamiinin (MDMA) laittomassa tuotannossa, joka tunnetaan myös katunimillä "ecstasy" tai "Molly", ja safrolin ja sassafrasöljyn myyntiä valvoo Yhdysvaltain huumevalvontaviranomainen.
-
Tukkuhinta 100 % Pure Stellariae Radix eteerinen öljy (uusi) Relax Aromatherapy Eucalyptus globulus
Kiinan farmakopea (2020 painos) edellyttää, että YCH:n metanoliuutteen ei tulisi olla alle 20,0 % [2] ilman muita laadunarviointiindikaattoreita. Tämän tutkimuksen tulokset osoittavat, että sekä luonnonvaraisten että viljeltyjen näytteiden metanoliuutteiden sisältö täytti farmakopean standardin, eikä niissä ollut merkittävää eroa. Tästä syystä luonnonvaraisten ja viljeltyjen näytteiden välillä ei ollut ilmeistä laatueroa tuon indeksin mukaan. Kuitenkin kokonaissterolien ja kokonaisflavonoidien pitoisuudet luonnonvaraisissa näytteissä olivat merkittävästi korkeammat kuin viljellyissä näytteissä. Lisämetabominen analyysi paljasti runsaan metaboliittien monimuotoisuuden luonnonvaraisten ja viljeltyjen näytteiden välillä. Lisäksi seulottiin 97 merkittävästi erilaista metaboliittia, jotka on lueteltu luettelossaTäydentävä taulukko S2. Näihin merkittävästi erilaisiin metaboliitteihin kuuluvat β-sitosteroli (ID on M397T42) ja kversetiinijohdannaiset (M447T204_2), joiden on raportoitu olevan aktiivisia ainesosia. Aiemmin raportoimattomat aineosat, kuten trigonelliini (M138T291_2), betaiini (M118T277_2), fustiini (M269T36), rotenoni (M241T189), arktiin (M557T165) ja logaanihappo (M399T284), kuuluivat myös erilaisten metaboliitteihin. Näillä komponenteilla on erilaisia rooleja hapettumisen estossa, anti-inflammatorisessa, vapaiden radikaalien poistamisessa, syövän vastaisessa ja ateroskleroosin hoidossa, ja siksi ne voivat muodostaa oletettuja uusia aktiivisia komponentteja YCH:ssa. Vaikuttavien aineosien pitoisuus määrää lääkeaineiden tehon ja laadun [7]. Yhteenvetona voidaan todeta, että metanoliuutteella ainoana YCH-laadunarviointiindeksinä on joitain rajoituksia, ja tarkempia laatumerkkejä on tutkittava edelleen. Kokonaissterolien, kokonaisflavonoidien ja monien muiden erilaisten metaboliittien pitoisuuksissa oli merkittäviä eroja luonnonvaraisen ja viljellyn YCH:n välillä; joten niiden välillä saattaa olla laatueroja. Samalla YCH:n äskettäin löydetyillä mahdollisilla tehoaineilla voi olla tärkeä referenssiarvo YCH:n toiminnallisen perustan tutkimuksessa ja YCH:n resurssien edelleen kehittämisessä.
Aitojen lääkemateriaalien merkitys on jo pitkään tunnustettu tietyllä alkuperäalueella erinomaisten kiinalaisten kasviperäisten lääkkeiden valmistuksessa [8]. Korkea laatu on aitojen lääkemateriaalien olennainen ominaisuus, ja elinympäristö on tärkeä tekijä, joka vaikuttaa tällaisten materiaalien laatuun. Siitä lähtien, kun YCH:ta alettiin käyttää lääkkeenä, sitä on pitkään hallinnut villi YCH. YCH:n onnistuneen käyttöönoton ja kesyttämisen jälkeen Ningxiassa 1980-luvulla Yinchaihun lääkinnällisten materiaalien lähde siirtyi vähitellen luonnonvaraisista viljeltyihin YCH:iin. YCH:n lähteitä koskevan aikaisemman tutkimuksen mukaan [9] ja tutkimusryhmämme kenttätutkimuksen mukaan viljeltyjen ja luonnonvaraisten lääkeaineiden levinneisyysalueilla on merkittäviä eroja. Villi YCH on levinnyt pääasiassa Ningxia Huin autonomiselle alueelle Shaanxin maakunnassa, sisä-Mongolian kuivien vyöhykkeiden ja Ningxian keskiosan vieressä. Erityisesti näiden alueiden aavikkoaro on sopivin elinympäristö YCH:n kasvulle. Sitä vastoin viljelty YCH on pääasiassa jaettu luonnonvaraisen levinneisyysalueen eteläpuolelle, kuten Tongxin County (Cultivated I) ja sitä ympäröivät alueet, josta on tullut Kiinan suurin viljely- ja tuotantokanta, ja Pengyang County (Cultivated II) , joka sijaitsee eteläisemmällä alueella ja on toinen viljellyn YCH:n tuotantoalue. Lisäksi näiden kahden viljelyalueen elinympäristöt eivät ole aavikkoaroja. Siksi tuotantotavan lisäksi luonnonvaraisen ja viljellyn YCH:n elinympäristössä on merkittäviä eroja. Kasvuympäristö on tärkeä kasviperäisten lääkeaineiden laatuun vaikuttava tekijä. Erilaiset elinympäristöt vaikuttavat sekundääristen aineenvaihduntatuotteiden muodostumiseen ja kertymiseen kasveissa, mikä vaikuttaa lääkkeiden laatuun [10,11]. Tästä syystä merkittävät erot kokonaisflavonoidien ja kokonaissterolien pitoisuuksissa sekä 53 metaboliitin ilmentymisessä, jotka löysimme tässä tutkimuksessa, voivat johtua kenttähoidosta ja elinympäristöeroista.Yksi tärkeimmistä tavoista, joilla ympäristö vaikuttaa lääkeaineiden laatuun, on lähdekasvien rasittaminen. Kohtalainen ympäristöstressi stimuloi sekundaaristen metaboliittien kertymistä [12,13]. Kasvu/erilaistumisen tasapainohypoteesi väittää, että kun ravinteita on riittävästi, kasvit ensisijaisesti kasvavat, kun taas ravinteiden puutteessa kasvit pääasiassa erilaistuvat ja tuottavat enemmän sekundaarisia aineenvaihduntatuotteita.14]. Veden puutteen aiheuttama kuivuusstressi on kuivien alueiden kasvien tärkein ympäristöstressi. Tässä tutkimuksessa viljellyn YCH:n vesitilanne on runsaampi, ja vuotuiset sademäärät ovat huomattavasti korkeammat kuin luonnonvaraisen YCH:n (Cultivated I:n vesivarasto oli noin 2 kertaa Wildin; Cultivated II:n noin 3,5 kertaa Wildin vesivarasto ). Lisäksi luonnonvaraisen ympäristön maaperä on hiekkamaata, mutta viljelymaan maaperä on savimaata. Saveen verrattuna hiekkaisella maalla on huono vedenpidätyskyky ja se lisää todennäköisemmin kuivuusstressiä. Samaan aikaan viljelyprosessiin liittyi usein kastelua, joten kuivuusstressi oli alhainen. Villi YCH kasvaa ankarissa luonnollisissa kuivissa elinympäristöissä, ja siksi se voi kärsiä vakavammasta kuivuusstressistä.Osmoregulaatio on tärkeä fysiologinen mekanismi, jolla kasvit selviävät kuivuusstressistä, ja alkaloidit ovat tärkeitä osmoottisia säätelyaineita korkeammissa kasveissa.15]. Betaiinit ovat vesiliukoisia kvaternaarisia alkaloidiammoniumyhdisteitä ja voivat toimia osmoprotektantteina. Kuivuusstressi voi vähentää solujen osmoottista potentiaalia, kun taas osmoprotektantit säilyttävät ja ylläpitävät biologisten makromolekyylien rakennetta ja eheyttä sekä lievittävät tehokkaasti kuivuusstressin kasveille aiheuttamia vahinkoja [16]. Esimerkiksi kuivuusstressissä sokerijuurikkaan ja Lycium barbarumin betaiinipitoisuus nousi merkittävästi [17,18]. Trigonelliini on solujen kasvun säätelijä, ja kuivuusstressissä se voi pidentää kasvin solusyklin pituutta, estää solujen kasvua ja johtaa solutilavuuden kutistumiseen. Liuenneen aineen pitoisuuden suhteellinen kasvu solussa mahdollistaa kasvin osmoottisen säätelyn ja kykynsä vastustaa kuivuusstressiä.19]. JIA X [20] havaitsi, että kuivuusstressin lisääntyessä Astragalus membranaceus (perinteisen kiinalaisen lääketieteen lähde) tuotti enemmän trigoneliinia, joka säätelee osmoottista potentiaalia ja parantaa kykyä vastustaa kuivuusstressiä. Flavonoideilla on myös osoitettu olevan tärkeä rooli kasvien kestävyydessä kuivuusstressiä vastaan.21,22]. Useat tutkimukset ovat vahvistaneet, että kohtalainen kuivuusstressi on edistänyt flavonoidien kertymistä. Lang Duo-Yong et ai. [23] vertaili kuivuusstressin vaikutuksia YCH:hen säätelemällä vedenpidätyskykyä kentällä. Todettiin, että kuivuusstressi esti juurten kasvua jossain määrin, mutta kohtalaisessa ja vakavassa kuivuusstressissä (40 % pellon vedenpidätyskykyä) YCH:n flavonoidien kokonaispitoisuus nousi. Samaan aikaan kuivuusstressissä fytosterolit voivat säädellä solukalvon juoksevuutta ja läpäisevyyttä, estää veden menetystä ja parantaa stressinsietokykyä.24,25]. Siksi flavonoidien, kokonaissterolien, betaiinin, trigoneliinin ja muiden sekundääristen metaboliittien lisääntynyt kertyminen villiin YCH:iin saattaa liittyä voimakkaaseen kuivuusstressiin.Tässä tutkimuksessa KEGG-reitin rikastusanalyysi suoritettiin metaboliiteille, joiden havaittiin olevan merkittävästi erilaisia luonnonvaraisen ja viljellyn YCH:n välillä. Rikastettuihin metaboliitteihin kuuluivat ne, jotka osallistuivat askorbaatti- ja aldaraattiaineenvaihduntaan, aminoasyyli-tRNA-biosynteesiin, histidiinimetaboliaan ja beeta-alaniinimetaboliaan. Nämä aineenvaihduntareitit liittyvät läheisesti kasvien stressiresistenssimekanismeihin. Niistä askorbaattiaineenvaihdunnalla on tärkeä rooli kasvien antioksidanttien tuotannossa, hiilen ja typen aineenvaihdunnassa, stressinkestävyydessä ja muissa fysiologisissa toiminnoissa.26]; aminoasyyli-tRNA:n biosynteesi on tärkeä reitti proteiinin muodostukselle.27,28], joka osallistuu stressiresistenttien proteiinien synteesiin. Sekä histidiini- että β-alaniinireitit voivat parantaa kasvien sietokykyä ympäristön stressille [29,30]. Tämä osoittaa edelleen, että erot metaboliitteissa luonnonvaraisen ja viljellyn YCH:n välillä liittyivät läheisesti stressiresistenssiprosesseihin.Maaperä on aineellinen perusta lääkekasvien kasvulle ja kehitykselle. Maaperässä oleva typpi (N), fosfori (P) ja kalium (K) ovat tärkeitä ravintoaineita kasvien kasvulle ja kehitykselle. Maaperän orgaaninen aines sisältää myös N, P, K, Zn, Ca, Mg ja muita lääkekasveille tarvittavia makro- ja hivenaineita. Liialliset tai puutteelliset ravintoaineet tai epätasapainoiset ravinnesuhteet vaikuttavat kasvuun ja kehitykseen sekä lääkeaineiden laatuun, ja eri kasveilla on erilaiset ravintotarpeet [31,32,33]. Esimerkiksi alhainen N-stressi edisti alkaloidien synteesiä Isatis indigoticassa ja oli hyödyllinen flavonoidien kertymiselle kasveissa, kuten Tetrastigma hemsleyanum, Crataegus pinnatifida Bunge ja Dichondra repens Forst. Sitä vastoin liian paljon typpeä esti flavonoidien kertymistä eri lajeihin, kuten Erigeron breviscapus, Abrus cantoniensis ja Ginkgo biloba, ja vaikutti lääkeaineiden laatuun.34]. P-lannoitteen levittäminen lisäsi tehokkaasti glysyrritsiinihapon ja dihydroasetonin pitoisuutta Ural-lakritsissa [35]. Kun levitysmäärä ylitti 0,12 kg·m−2, Tussilago farfaran kokonaisflavonoidipitoisuus laski [36]. P-lannoitteen levittäminen vaikutti negatiivisesti polysakkaridien pitoisuuteen perinteisessä kiinalaisen lääketieteen rhizoma polygonatissa [37], mutta K-lannoite lisäsi tehokkaasti sen saponiinipitoisuutta [38]. 450 kg·hm−2 K lannoite oli paras kaksivuotiaan Panax notoginsengin kasvulle ja saponiinin kertymiselle [39]. Suhteessa N:P:K = 2:2:1 hydrotermisen uutteen, harpagidin ja harpagosidin kokonaismäärät olivat suurimmat [40]. Korkea N, P ja K suhde auttoi edistämään Pogostemon cablinin kasvua ja lisäämään haihtuvien öljyjen pitoisuutta. Alhainen N:n, P:n ja K:n suhde lisäsi Pogostemon-varren lehtiöljyn tärkeimpien tehokkaiden komponenttien pitoisuutta [41]. YCH on karua maaperää sietävä kasvi, ja sillä voi olla erityisiä ravintoaineita, kuten N, P ja K. Tässä tutkimuksessa viljeltyyn YCH:aan verrattuna luonnonvaraisten YCH-kasvien maaperä oli suhteellisen karu: maaperän sisältö orgaanisesta aineksesta kokonaisN, kokonaisP ja kokonaisK olivat vastaavasti noin 1/10, 1/2, 1/3 ja 1/3 vastaavasti viljelykasveista. Siksi erot maaperän ravintoaineissa saattavat olla toinen syy viljellyn ja luonnonvaraisen YCH:n aineenvaihduntatuotteiden eroihin. Weibao Ma et ai. [42] havaitsi, että tietyn määrän N-lannoitetta ja P-lannoitetta paransivat merkittävästi siementen satoa ja laatua. Ravinteiden vaikutus YCH:n laatuun ei kuitenkaan ole selvä ja lannoitustoimenpiteet lääkeaineiden laadun parantamiseksi vaativat lisäselvitystä.Kiinalaisilla kasviperäisillä lääkkeillä on ominaisuudet "suotuisat elinympäristöt edistävät satoa ja epäsuotuisat elinympäristöt parantavat laatua" [43]. Kasvien elinympäristö muuttui asteittaisen luonnonvaraisesta viljellyksi viljelykasveista kuivilta ja karuilta aavikkoaroilta hedelmällisiksi viljelysmaiksi, joissa on runsaammin vettä. Viljellyn YCH:n elinympäristö on parempi ja sato suurempi, mikä auttaa vastaamaan markkinoiden kysyntään. Tämä ylivoimainen elinympäristö johti kuitenkin merkittäviin muutoksiin YCH:n metaboliiteissa; Edistääkö tämä YCH:n laadun parantamista ja kuinka tieteellisiin viljelytoimiin saadaan aikaan korkealaatuinen YCH:n tuotanto, vaatii lisätutkimusta.Simuloiva elinympäristön viljely on menetelmä luonnonvaraisten lääkekasvien elinympäristön ja ympäristöolosuhteiden simuloimiseksi, joka perustuu tietoon kasvien pitkäaikaisesta sopeutumisesta erityisiin ympäristön rasituksiin.43]. Simuloimalla erilaisia ympäristötekijöitä, jotka vaikuttavat luonnonvaraisiin kasveihin, erityisesti aitojen lääkeaineiden lähteinä käytettyjen kasvien alkuperäiseen elinympäristöön, lähestymistapa käyttää tieteellistä suunnittelua ja innovatiivista ihmisen toimintaa tasapainottaakseen kiinalaisten lääkekasvien kasvua ja sekundaarista aineenvaihduntaa.43]. Menetelmillä pyritään saavuttamaan optimaaliset järjestelyt korkealaatuisten lääkemateriaalien kehittämiseksi. Simulatiivisen elinympäristön viljelyn pitäisi tarjota tehokas tapa laadukkaaseen YCH:n tuotantoon silloinkin, kun farmakodynaaminen perusta, laatumerkit ja vastemekanismit ympäristötekijöihin ovat epäselviä. Tästä syystä ehdotamme, että tieteelliset suunnittelu- ja pellonhoitotoimenpiteet YCH:n viljelyssä ja tuotannossa tulisi toteuttaa luonnonvaraisen YCH:n ympäristöominaisuuksien, kuten kuivan, karun ja hiekkaisen maaperän, perusteella. Samalla toivotaan myös, että tutkijat tekevät syvempää tutkimusta YCH:n toiminnallisesta materiaaliperustasta ja laatumarkkereista. Nämä tutkimukset voivat tarjota tehokkaampia arviointiperusteita YCH:lle ja edistää laadukasta tuotantoa ja alan kestävää kehitystä. -
Herbal Fructus Amomi öljy Luonnollinen hieronta diffuusori 1kg Bulkki Amomum villosum eteerinen öljy
Zingiberaceae-perhe on herättänyt yhä enemmän huomiota allelopaattisessa tutkimuksessa sen jäsenlajien runsaiden haihtuvien öljyjen ja aromaattisuuden vuoksi. Aiemmat tutkimukset olivat osoittaneet, että Curcuma zedoariasta (zedoary) peräisin olevat kemikaalit [40], Alpinia zerumbet (Pers.) BLBurtt & RMSm. [41] ja Zingiber officinale Rosc. [42] inkivääriperheessä on allelopaattisia vaikutuksia maissin, salaatin ja tomaatin siementen itämiseen ja taimien kasvuun. Nykyinen tutkimuksemme on ensimmäinen raportti A. villosumin (Zingiberaceae-perheen jäsenen) varresta, lehdistä ja nuorista hedelmistä peräisin olevien haihtuvien aineiden allelopaattisesta aktiivisuudesta. Varsien, lehtien ja nuorten hedelmien öljysaanto oli 0,15 %, 0,40 % ja 0,50 %, mikä osoittaa, että hedelmät tuottivat enemmän haihtuvia öljyjä kuin varret ja lehdet. Varresta peräisin olevien haihtuvien öljyjen pääkomponentit olivat β-pineeni, β-fellandreeni ja α-pineeni, joka oli samanlainen kuin lehtiöljyn tärkeimmät kemikaalit, β-pineeni ja α-pineeni (monoterpeenihiilivedyt). Toisaalta nuorten hedelmien öljyssä oli runsaasti bornyyliasetaattia ja kamferia (hapetettuja monoterpeenejä). Tuloksia tukivat Do N Dai [30,32] ja Hui Ao [31], joka oli tunnistanut öljyt A. villosumin eri elimistä.
On ollut useita raportteja näiden pääyhdisteiden kasvien kasvua estävästä vaikutuksesta muissa lajeissa. Shalinder Kaur havaitsi, että eukalyptuksen α-pineeni alensi näkyvästi Amaranthus viridis L.:n juuren pituutta ja versojen korkeutta 1,0 µl:n pitoisuudella [43], ja toinen tutkimus osoitti, että α-pineeni esti varhaista juuren kasvua ja aiheutti oksidatiivisia vaurioita juurikudoksessa lisääntyneen reaktiivisten happilajien muodostumisen kautta [44]. Jotkut raportit ovat väittäneet, että β-pineeni esti testirikkakasvien itämistä ja taimien kasvua annoksesta riippuvaisella vasteella häiritsemällä kalvon eheyttä [45] muuttaen kasvin biokemiaa ja tehostaen peroksidaasien ja polyfenolioksidaasien toimintaa [46]. β-Phellandreeni esti maksimaalisesti Vigna unguiculata (L.) Walpin itämisen ja kasvun pitoisuudella 600 ppm [47], kun taas pitoisuudessa 250 mg/m3 kamferi tukahdutti Lepidium sativum L:n tähden ja versojen kasvun.48]. Kuitenkin tutkimukset, jotka raportoivat bornyyliasetaatin allelopaattisesta vaikutuksesta, ovat niukat. Tutkimuksessamme β-pineenin, bornyyliasetaatin ja kamferin allelopaattiset vaikutukset juuren pituuteen olivat heikommat kuin haihtuvilla öljyillä α-pineeniä lukuun ottamatta, kun taas α-pineeniä sisältävä lehtiöljy oli myös fytotoksisempaa kuin vastaava haihtuva. öljyt A. villosumin varresta ja hedelmistä, molemmat havainnot osoittavat, että α-pineeni saattaa olla tärkeä kemikaali tämän lajin allelopatialle. Samaan aikaan tulokset viittasivat myös siihen, että jotkin hedelmäöljyn yhdisteet, joita ei ollut runsaasti, saattavat edistää fytotoksisen vaikutuksen muodostumista, mikä vaatii lisätutkimusta tulevaisuudessa.Normaaleissa olosuhteissa allelopaattisten aineiden allelopaattinen vaikutus on lajikohtaista. Jiang et ai. havaitsivat, että Artemisia sieversianan tuottama eteerinen öljy vaikutti tehokkaammin Amaranthus retroflexus L.:iin kuin Medicago sativa L.:een, Poa annua L.:iin ja Pennisetum alopecuroides (L.) Sprengiin. [49]. Toisessa tutkimuksessa Lavandula angustifolia Millin haihtuva öljy. aiheutti eriasteisia fytotoksisia vaikutuksia eri kasvilajeihin. Lolium multiflorum Lam. oli herkin akseptorilaji, hyposirkkakasvu estyi 87,8 % ja 76,7 % vastaavasti annoksella 1 µl/ml öljyjä, mutta kurkun taimien hyposirkkakasvuun vaikutti tuskin [20]. Tuloksemme osoittivat myös, että L. sativan ja L. perennen välillä oli ero herkkyydessä A. villosumin haihtuville aineille.Saman lajin haihtuvat yhdisteet ja eteeriset öljyt voivat vaihdella määrällisesti ja/tai laadullisesti kasvuolosuhteiden, kasvinosien ja havaitsemismenetelmien vuoksi. Esimerkiksi raportti osoitti, että pyranoidi (10,3 %) ja β-karyofyleeni (6,6 %) olivat tärkeimmät Sambucus nigran lehtien haihtuvien aineiden yhdisteet, kun taas bentsaldehydi (17,8 %), α-bulneseeni (16,6 %) ja tetrakosaani (11,5 %) oli runsaasti lehdistä uutetuissa öljyissä [50]. Tutkimuksessamme tuoreiden kasvimateriaalien vapauttamilla haihtuvilla yhdisteillä oli voimakkaammat allelopaattiset vaikutukset testikasveihin kuin uutetuilla haihtuvilla öljyillä, ja vasteerot liittyvät läheisesti molempien valmisteiden allelokemikaalien eroihin. Tarkkoja eroja haihtuvien yhdisteiden ja öljyjen välillä on tutkittava tarkemmin myöhemmissä kokeissa.Erot mikrobien monimuotoisuudessa ja mikrobiyhteisön rakenteessa maanäytteissä, joihin oli lisätty haihtuvia öljyjä, liittyivät mikro-organismien väliseen kilpailuun sekä mahdollisiin myrkyllisiin vaikutuksiin ja haihtuvien öljyjen kestoon maaperässä. Vokou ja Liotiri [51] havaitsi, että neljän eteerisen öljyn (0,1 ml) levittäminen viljelymaahan (150 g) aktivoi maanäytteiden hengityksen, jopa öljyt erosivat kemiallisesta koostumuksestaan, mikä viittaa siihen, että kasviöljyjä käytetään hiili- ja energialähteenä maaperässä esiintyviä mikro-organismeja. Nykyisestä tutkimuksesta saadut tiedot vahvistivat, että koko A. villosumin kasvin öljyt vaikuttivat selvästi maaperän sienilajien määrän lisääntymiseen 14. päivään mennessä öljyn lisäämisen jälkeen, mikä osoittaa, että öljy voi tarjota hiilen lähteen useammille maaperän sieniä. Toisessa tutkimuksessa raportoitiin löydöksestä: maaperän mikro-organismit palasivat alkuperäiseen toimintakykynsä ja biomassansa Thymbra capitata L. (Cav) -öljyn lisäämisen aiheuttaman tilapäisen vaihtelun jälkeen, mutta öljyn suurin annos (0,93 µl öljyä grammaa maaperää kohti) eivät antaneet maaperän mikro-organismien palauttaa alkuperäistä toiminnallisuutta [52]. Tässä tutkimuksessa maaperän mikrobiologiseen analyysiin perustuen eri päivien ja eri pitoisuuksien käsittelyn jälkeen arvelimme, että maaperän bakteeriyhteisö palautuisi useiden päivien jälkeen. Sen sijaan sienimikrobisto ei voi palata alkuperäiseen tilaansa. Seuraavat tulokset vahvistavat tämän hypoteesin: öljyn korkean pitoisuuden selkeä vaikutus maaperän sienimikrobiomin koostumukseen paljastui pääkoordinaattianalyysillä (PCoA), ja lämpökartan esitykset vahvistivat jälleen, että maaperän sieniyhteisön koostumus. Käsitelty 3,0 mg/ml öljyllä (eli 0,375 mg öljyä grammaa maaperää kohti) suvun tasolla erosi huomattavasti muista käsittelyistä. Tällä hetkellä tutkimusta monoterpeenihiilivetyjen tai happipitoisten monoterpeenien lisäämisen vaikutuksista maaperän mikrobien monimuotoisuuteen ja yhteisön rakenteeseen on vielä vähän. Muutamat tutkimukset raportoivat, että α-pineeni lisäsi maaperän mikrobiaktiivisuutta ja Methylophilaceae-bakteerien (ryhmä metylotrofeja, proteobakteereja) suhteellista runsautta alhaisessa kosteuspitoisuudessa, ja sillä on tärkeä rooli hiilenlähteenä kuivemmissa maaperässä.53]. Samoin A. villosumin kokokasvin haihtuva öljy, joka sisältää 15,03 % α-pineeniä (Täydentävä taulukko S1), lisäsi ilmeisesti proteobakteerien suhteellista runsautta 1,5 mg/ml ja 3,0 mg/ml, mikä viittasi siihen, että α-pineeni mahdollisesti toimii yhtenä maaperän mikro-organismien hiilen lähteistä.A. villosumin eri elinten tuottamilla haihtuvilla yhdisteillä oli eriasteisia allelopaattisia vaikutuksia L. sativaan ja L. perenneen, mikä oli läheistä sukua A. villosumin kasviosien sisältämille kemiallisille aineosille. Vaikka haihtuvan öljyn kemiallinen koostumus vahvistettiin, A. villosumin huoneenlämpötilassa vapauttamia haihtuvia yhdisteitä ei tunneta, mikä vaatii lisätutkimuksia. Lisäksi eri allelokemikaalien synergistinen vaikutus on myös huomioimisen arvoinen. Mitä tulee maaperän mikro-organismeihin, jotta haihtuvan öljyn vaikutusta maaperän mikro-organismeihin voitaisiin tutkia kattavasti, meidän on vielä tehtävä syvällisempää tutkimusta: pidennettävä haihtuvan öljyn käsittelyaikaa ja havaittava vaihtelut maaperän haihtuvan öljyn kemiallisessa koostumuksessa. eri päivinä. -
Puhdas Artemisia capillaris öljy kynttilän ja saippuan valmistukseen tukkuhajotin eteerinen öljy uusi ruokopolttimen diffuusoriin
Jyrsijämallin suunnittelu
Eläimet jaettiin satunnaisesti viiteen ryhmään, joissa kussakin oli viisitoista hiirtä. Kontrolliryhmän ja malliryhmän hiiret annettiin letkullaseesamiöljyä6 päivän ajan. Positiivisen kontrolliryhmän hiirille annettiin letkuletku bifendaattitableteilla (BT, 10 mg/kg) 6 päivän ajan. Koeryhmiä käsiteltiin 100 mg/kg ja 50 mg/kg AEO:lla seesamiöljyyn liuotettuna 6 päivän ajan. Päivänä 6 kontrolliryhmää käsiteltiin seesamiöljyllä, ja kaikkia muita ryhmiä käsiteltiin yhdellä annoksella 0,2 % CCl4:a seesamiöljyssä (10 ml/kg)intraperitoneaalinen injektio. Hiiret paastottiin sitten ilman vettä, ja verinäytteet kerättiin retrobulbaarisuonista; kerätty veri sentrifugoitiin 3000 xg10 minuuttia seerumin erottamiseksi.Kohdunkaulan dislokaatiosuoritettiin välittömästi veren oton jälkeen, ja maksanäytteet poistettiin välittömästi. Yksi osa maksanäytteestä säilytettiin välittömästi -20 °C:ssa analyysiin asti, ja toinen osa leikattiin pois ja kiinnitettiin 10 %:iin.formaliiniratkaisu; Loput kudokset säilytettiin -80 °C:ssa histopatologista analyysiä varten (Wang ym., 2008,Hsu ym., 2009,Nie et al., 2015).
Biokemiallisten parametrien mittaus seerumissa
Maksavaurio arvioitiin arvioimallaentsymaattiset toiminnotseerumin ALT ja AST käyttämällä vastaavia kaupallisia sarjoja sarjojen ohjeiden mukaisesti (Nanjing, Jiangsun maakunta, Kiina). Entsymaattiset aktiivisuudet ilmaistiin yksiköinä litraa kohti (U/l).
MDA:n, SOD:n, GSH:n ja GSH-P:n mittausxmaksahomogenaateissa
Maksakudokset homogenisoitiin kylmällä fysiologisella suolaliuoksella suhteessa 1:9 (paino/tilavuus, maksa:suolaliuos). Homogenaatit sentrifugoitiin (2500 xg10 min) supernatanttien keräämiseksi myöhempiä määrityksiä varten. Maksavauriot arvioitiin maksan MDA- ja GSH-tasojen sekä SOD- ja GSH-P-mittausten perusteella.xtoimintaa. Kaikki nämä määritettiin pakkauksessa olevien ohjeiden mukaisesti (Nanjing, Jiangsun maakunta, Kiina). MDA:n ja GSH:n tulokset ilmaistiin nmolina proteiinin mg:aa kohti (nmol/mg prot) ja SOD:n ja GSH-P:n aktiivisuuksina.xilmaistiin U/mg proteiinia (U/mg prot).
Histopatologinen analyysi
Osat juuri saadusta maksasta kiinnitettiin 10 % puskuroidussaparaformaldehydifosfaattiliuos. Näyte upotettiin sitten parafiiniin, leikattiin 3–5 μm:n paloiksi, värjättiinhematoksyliinijaeosiini(H&E) standardimenettelyn mukaisesti ja lopuksi analysoinutvalomikroskopia(Tian ym., 2012).
Tilastollinen analyysi
Tulokset ilmaistiin keskiarvona ± standardipoikkeama (SD). Tulokset analysoitiin tilasto-ohjelmalla SPSS Statistics, versio 19.0. Tiedoille tehtiin varianssianalyysi (ANOVA,p< 0,05), jota seurasi Dunnettin testi ja Dunnettin T3-testi tilastollisesti merkitsevien erojen määrittämiseksi eri koeryhmien arvojen välillä. Merkittävä ero pidettiin tasollap< 0,05.
Tuloksia ja keskustelua
AEO:n ainesosat
GC/MS-analyysissä AEO:n havaittiin sisältävän 25 ainesosaa, jotka eluoituivat 10–35 minuutin aikana, ja tunnistettiin 21 ainesosaa, jotka vastaavat 84 % eteerisestä öljystä (Taulukko 1). Haihtuva öljy sisälsimonoterpenoidit(80,9 %), seskviterpenoidit (9,5 %), tyydyttyneet haarautumattomat hiilivedyt (4,86 %) ja sekalainen asetyleeni (4,86 %). Verrattuna muihin tutkimuksiin (Guo et ai., 2004), löysimme AEO:sta runsaasti monoterpenoideja (80,90 %). Tulokset osoittivat, että AEO:n runsain ainesosa on β-sitronelloli (16,23 %). Muita AEO:n pääkomponentteja ovat 1,8-cineoli (13,9 %),kamferi(12,59 %),linalool(11,33 %), α-pineeni (7,21 %), β-pineeni (3,99 %),tymoli(3,22 %) jamyrseeniä(2,02 %). Kemiallisen koostumuksen vaihtelu voi liittyä ympäristöolosuhteisiin, joille kasvi on alttiina, kuten kivennäisveteen, auringonvaloon, kehitysvaiheeseen jaravitsemus.
-
Puhdas Saposhnikovia divaricata öljy kynttilän ja saippuan valmistukseen tukkuhajottimen eteerinen öljy uusi ruokopolttimen diffuusoriin
2.1. SDE:n valmistelu
SD:n juurakot ostettiin kuivattuina yrtteinä Hanherb Co:lta (Guri, Korea). Tohtori Go-Ya Choi Korean itämaisen lääketieteen instituutista (KIOM) vahvisti kasvimateriaalit taksonomisesti. Lahjakorttinäyte (numero 2014 SDE-6) talletettiin Korean Herbarium of Standard Herbal Resources -kirjastoon. Kuivatut SD:n juurakot (320 g) uutettiin kahdesti 70-prosenttisella etanolilla (2 tunnin palautusjäähdyttäen) ja sitten uute konsentroitiin alennetussa paineessa. Keite suodatettiin, lyofilisoitiin ja säilytettiin 4 °C:ssa. Kuivatun uutteen saanto raa'ista lähtöaineista oli 48,13 % (w/w).
2.2. Kvantitatiivinen korkean suorituskyvyn nestekromatografia (HPLC) -analyysi
Kromatografinen analyysi suoritettiin HPLC-järjestelmällä (Waters Co., Milford, MA, USA) ja valodiodirividetektorilla. SDE:n HPLC-analyysiä varten prim-O-glukosyylisimifugiinistandardi ostettiin Korea Promotion Institute for Traditional Medicine Industrylta (Gyeongsan, Korea) jasec-O-glukosyylihamaudoli ja 4′-O-β-D-glukosyyli-5-O-metyylivisaminoli eristettiin laboratoriossamme ja tunnistettiin spektraalisilla analyyseillä, pääasiassa NMR:llä ja MS:llä.
SDE-näytteet (0,1 mg) liuotettiin 70-prosenttiseen etanoliin (10 ml). Kromatografinen erotus suoritettiin XSelect HSS T3 C18 -kolonnilla (4,6 × 250 mm, 5μm, Waters Co., Milford, MA, USA). Liikkuva faasi koostui asetonitriilistä (A) ja 0,1 % etikkahaposta vedessä (B) virtausnopeudella 1,0 ml/min. Monivaiheista gradienttiohjelmaa käytettiin seuraavasti: 5 % A (0 min), 5–20 % A (0–10 min), 20 % A (10–23 min) ja 20–65 % A (23–40 min). ). Havaitsemisaallonpituus skannattiin aallonpituudella 210–400 nm ja tallennettiin aallonpituudella 254 nm. Injektiotilavuus oli 10,0μL. Standardiliuokset kolmen kromonin määrittämistä varten valmistettiin lopullisella konsentraatiolla 7,781 mg/ml (prim-O-glukosyylisimifugiini), 31,125 mg/ml (4′-O-β-D-glukosyyli-5-O-metyylivisaminoli) ja 31,125 mg/ml (sec-O-glukosyylihamaudoli) metanolissa ja pidettiin 4 °C:ssa.
2.3. Tulehduksen vastaisen toiminnan arviointiIn vitro
2.3.1. Soluviljely ja näytekäsittely
RAW 264.7 -solut saatiin American Type Culture Collectionista (ATCC, Manassas, VA, USA) ja kasvatettiin DMEM-elatusaineessa, joka sisälsi 1 % antibiootteja ja 5,5 % FBS:ää. Soluja inkuboitiin kostutetussa ilmakehässä, jossa oli 5 % C02:ta 37 °C:ssa. Solujen stimuloimiseksi väliaine korvattiin tuoreella DMEM-elatusaineella ja lipopolysakkaridilla (LPS, Sigma-Aldrich Chemical Co., St. Louis, MO, USA) 1 °C:ssaμg/ml lisättiin SDE:n läsnä ollessa tai ilman sitä (200 tai 400μg/ml) vielä 24 tunnin ajan.
2.3.2. Typpioksidin (NO), prostaglandiini E2:n (PGE2), tuumorinekroositekijän määritysα(TNF-α) ja interleukiini-6:n (IL-6) tuotanto
Soluja käsiteltiin SDE:llä ja stimuloitiin LPS:llä 24 tunnin ajan. NO-tuotanto analysoitiin mittaamalla nitriittiä Griess-reagenssilla aikaisemman tutkimuksen mukaan [12]. Tulehduksellisten sytokiinien PGE2, TNF- eritysαja IL-6 määritettiin käyttämällä ELISA-sarjaa (R&D-järjestelmät) valmistajan ohjeiden mukaisesti. SDE:n vaikutukset NO:n ja sytokiinien tuotantoon määritettiin aallonpituudella 540 nm tai 450 nm Wallac EnVisionilla.™mikrolevylukija (PerkinElmer).
2.4. Antiosteoartriitin toiminnan arviointiIn vivo
2.4.1. Eläimet
Urospuoliset Sprague-Dawley-rotat (7 viikkoa vanhoja) ostettiin Samtako Inc:ltä (Osan, Korea) ja niitä pidettiin kontrolloiduissa olosuhteissa 12 tunnin valo/pimeä-syklillä klo.°C ja% kosteus. Rotille annettiin laboratorioruokaa ja vettäad libitum. Kaikki kokeelliset toimenpiteet suoritettiin National Institutes of Health (NIH) -ohjeiden mukaisesti ja Daejeonin yliopiston (Daejeon, Korean tasavalta) eläinten hoito- ja käyttökomitean hyväksymät.
2.4.2. OA:n induktio MIA:lla rotilla
Eläimet satunnaistettiin ja jaettiin hoitoryhmiin ennen tutkimuksen aloittamista (ryhmää kohti). MIA-liuos (3 mg/50μL 0,9 % suolaliuosta) injektoitiin suoraan oikean polven nivelensisäiseen tilaan ketamiinin ja ksylatsiinin seoksella indusoidussa nukutuksessa. Rotat jaettiin satunnaisesti neljään ryhmään: (1) suolaliuosryhmä ilman MIA-injektiota, (2) MIA-ryhmä, jossa oli MIA-injektio, (3) SDE-käsitelty ryhmä (200 mg/kg) MIA-injektiolla ja (4) ) indometasiinilla (IM-) käsitelty ryhmä (2 mg/kg) MIA-injektiolla. Rotille annettiin suun kautta SDE:tä ja IM:ää 1 viikko ennen MIA-injektiota 4 viikon ajan. Tässä tutkimuksessa käytetyt SDE:n ja IM:n annokset perustuivat aiemmissa tutkimuksissa käytettyihin annostuksiin [10,13,14].
2.4.3. Takassun painon jakauman mittaukset
OA-induktion jälkeen takatassujen painonkantokyvyn alkuperäinen tasapaino häiriintyi. Kantavuustoleranssin muutosten arvioimiseen käytettiin kyvyttömyystesteriä (Linton Instrumentation, Norfolk, UK). Rotat asetettiin varovasti mittauskammioon. Takarajan kohdistama painoa kantava voima laskettiin keskiarvoksi 3 sekunnin ajanjaksolta. Painon jakautumissuhde laskettiin seuraavalla yhtälöllä: [oikean takaraajan paino/(oikean takaraajan paino + vasemman takaraajan paino)] × 100 [15].
2.4.4. Seerumin sytokiinitasojen mittaukset
Verinäytteet sentrifugoitiin 1500 g:ssä 10 minuuttia 4 °C:ssa; sitten seerumi kerättiin ja säilytettiin -70 °C:ssa käyttöön asti. IL-1:n tasotβIL-6, TNF-α, ja seerumin PGE2 mitattiin käyttämällä R&D Systemsin (Minneapolis, MN, USA) ELISA-pakkauksia valmistajan ohjeiden mukaisesti.
2.4.5. Reaaliaikainen kvantitatiivinen RT-PCR-analyysi
Kokonais-RNA uutettiin polvinivelkudoksesta käyttämällä TRI-reagenssia® (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA), käänteistranskriptoitiin cDNA:ksi ja PCR-monistettiin käyttämällä TM One Step RT PCR -pakkausta SYBR vihreällä (Applied Biosystems). , Grand Island, NY, USA). Reaaliaikainen kvantitatiivinen PCR suoritettiin käyttämällä Applied Biosystems 7500 Real-Time PCR -järjestelmää (Applied Biosystems, Grand Island, NY, USA). Alukesekvenssit ja koetinsekvenssi on esitetty taulukossa1. Alikvootit näyte-cDNA:sta ja yhtä suuri määrä GAPDH-cDNA:ta monistettiin TaqMan® Universal PCR -perusseoksella, joka sisälsi DNA-polymeraasia valmistajan ohjeiden mukaisesti (Applied Biosystems, Foster, CA, USA). PCR-olosuhteet olivat 2 min 50 °C:ssa, 10 min 94 °C:ssa, 15 s 95 °C:ssa ja 1 min 60 °C:ssa 40 syklin ajan. Kohdegeenin konsentraatio määritettiin käyttämällä vertailevaa Ct-menetelmää (kynnyssyklin lukumäärä monistuskäyrän ja kynnyksen välisessä risteyskohdassa) valmistajan ohjeiden mukaisesti.
